铜绿假单胞菌增强型绿色荧光蛋白标记的研究

根据增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因设计了上下游引物P1和P2,通过对铜绿假单胞菌菌株X3绿色荧光蛋白标记研究,构建了铜绿假单胞菌标记系统,获得带有EGFP标记的基因工程菌X9,为进行相关的跟踪研究创造了条件.该菌株绿色荧光标记性能稳定.通过转化子基因组DNAPCR和斑点杂交检测,外源EGFP基因存在于转化子染色体上. 图 6参 14     

绿色荧光蛋白标记在生物修复中的应用

通过对铜绿假单胞菌进行增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记,获得带有EGFP遗传标记的铜绿假单胞菌.该菌株绿色荧光标记性能稳定,通过转化子基因组DNAPCR和斑点杂交检测,证明外源EGFP基因存在于转化子染色体上.转化子30h内将溶液的表面张力由70mN/m降至35mN/m,产生的生物表面活性剂性能良好.     

绿色荧光蛋白基因在根际优势菌株中的高效表达

从人工模拟污染土壤中的黄麻根际分离得到两株优势菌株。通过PCR技术对增强绿色荧光蛋白基因与质粒载体pTnMod Ocm进行体外重组构建新的质粒 ,并转化分离得到的优势菌株。结果表明增强绿色荧光蛋白基因在黄麻根际优势菌株中高效表达     

根际微生物耦合降解系统的构建及其对蒽污染土壤的修复

摘要将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的黄麻土生根际优势菌Tu-1B分别与葸高效降解菌An-2和生物表面活性剂产生菌P7-50进行原生质体电融合，得到两株具有荧光标记的融合子Tu-An和Tu-P．将二融合子接种于植物根际土壤，构建根际微生物耦合降解系统，：在40d时该系统的最大降解率为96％．对根际土壤中的Tu-An融合子进行了检测，结果表明融合子在根际能稳定旺盛生长．图3表4参18     

选育蒽降解微生物耦合系统菌株的电融合及融合子的筛选

对选育蒽降解微生物耦合降解系统菌株的电融合过程及融合子的筛选进行研究.结果发现在500kHz的交流频率,脉冲强度300V/cm,脉冲幅宽为5μs,脉冲个数为2,交流电场强度在20～40 V/cm范围内,总融合率较稳定.可以用红霉素和氨苄青霉素的双抗平板来对表面活性剂产生菌与土生优势菌的融合子进行筛选,用含卡那霉素的蒽的高渗平板对蒽的高效降解菌和土生优势菌的融合子进行筛选.2种融合子均可以用绿色荧光来确证.     

离子注入法选育高效降解蒽的鞘氨醇单胞菌突变株

鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)AN1及其原生质体经N⁺ 离子注入诱变处理 ,蒽的降解率分别提高了29.3%和36.2%,总变异率分别为80%～100%、60%～80% ,耐蒽浓度分别达到300mg/L、400mg/L ;突变株经15代遗传稳定性检测,有2株(AN815-3,AN315-5)的性状可稳定遗传 ,其降解率分别为73%,75%,诱变效果显著.     

降解系统构建菌的原生质体制备及诱变研究

对根际微生物耦合降解系统的两种构建菌株的原生质体形成及再生条件进行研究。结果表明取对数期前期的生长细胞 ,在溶菌酶终浓度为 1mg/mL ,酶解时间为 0 .5h制备的原生质体形成率和再生率均高。在此基础上进行Co6 0 辐射诱变 ,筛选到抗性或营养缺陷型标记菌株共 85株     

离子注入在生物强化技术中的应用研究

生物强化技术在生物修复中显现出了强大的生命力,其核心是高效降解微生物。离子注入技术作为微生物菌种选育的一种新方法,其发现和建立对整个环境生物工程的进一步发展具有重大现实意义。     

降解系统构建菌的原生质体制制备及透变研究

对根际微生物耦合降解系统的两种构建菌株的原生质体形成及再生条件进行研究。结果表明取对数期前期生长细胞，在溶菌酶终浓度为1mg/mL，酶解时间为 0.5h制备的原生质体形成率和再生率均高。在些基础上进行Co^60辐射诱变，筛选到抗性或营养缺陷型标记菌株共85株。