大肠杆菌磷酸果糖激酶基因在氧化硫硫杆菌Tt-7中的表达

专性自养极端嗜酸性氧化硫硫杆菌缺乏EMP、ED途径以及三羧酸循环的关键酶 (如磷酸果糖激酶等 ) ,不能氧化有机物获得能量 .本文利用PCR技术扩增E .coliK 12磷酸果糖激酶 1基因 (pfkA) ,将该基因与广泛寄主的IncQ质粒pJRD2 15连接构建重组质粒pSDK 1,该质粒可与pfk基因缺陷株E .coliDF10 10互补 .通过接合转移的方式将其导入氧化硫硫杆菌Tt 7中并得到表达 .pSDK 1在宿主Tt 7中有较好的稳定性 ,在无选择压力条件下连续传 5 0代仍可保留 75 % .酶活性测定表明 ,pSDK 1的pfkA基因在缺陷株E .coliDF10 10中表达水平〔(96 .6± 0 .6 6 )U/g蛋白〕略高于原始菌株E .coliK 12〔(85 .9± 1.12 )U/g蛋白〕 ;而在氧化硫硫杆菌中则以较低水平进行表达〔(12 .4± 0 .73)U/g蛋白〕 ,并且其表达水平不受培养基中葡萄糖的影响 .实验表明 ,在无机盐培养基中加入葡萄糖时 ,含质粒pSDK 1的氧化硫硫杆菌Tt 7可利用培养基中的葡萄糖而加快生长 ,而对照菌株的生长则未受明显影响 ;但是重组菌利用葡萄糖的速度较缓慢 .图 5表 2参 16     

多能硫杆菌1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶的酶学特征及基因检测

从固体平板的生长情况及RubisCO酶活性测定结果，表明多能硫杆菌是通过卡尔文循环固定的CO2，并具有该循环的关键酶──1，5－二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶．进一步将多能硫杆菌染色体DNA用各种限制性内切酸酶切，Southern转移到硝酸纤维素滤膜上，与光合细菌Rhodobactersphaeroides的RubisCO基因（rbcL－rbcS）探针杂交，显示出杂交带型，说明多能硫杆菌具有R．sphaeroides同源的羧化酶基因，并初步将该基因定位在3．0kb的PstⅠ片段内．     

自养细菌在处理工业废水中的作用

自养细菌是一类能利用光能或通过氧化简单无机物获得化学能、将二氧化碳合成细胞有机物质的微生物.由于它们具有非凡的生物合成能力和对无机物的高度氧化活性,从而决定了在处理工业废水中的作用.(一)利用光合细菌处理高浓度工业有机废水光合细菌对高浓度有机废水具有很强的净     

氧化亚铁硫杆菌基因转移系统研究进展[综述]

氧化亚铁硫杆菌 (Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｎｓ)是极端嗜酸性的专性自养细菌 ,广泛分布于硫化矿床、酸性矿水及土壤中 ,最适生长ｐＨ 2 .0～ 2 .5 .氧化亚铁硫杆菌很早就被广泛应用于有用金属的浸出 ,特别适合于从低品位的矿石中浸出和回收稀有贵重金属 .这种方法具有低成本、低能耗、无污染等特点 ,因而在能源日益紧缺的今天 ,受到人们越来越多的关注 .目前许多国家已经成功地利用细菌浸出液技术开采多种金属 ,如铜、铀、金、钴、镍、锌和铅等 .其主要作用原理是通过氧化ＦｅＳＯ4 或ＦｅＳ2 产生Ｆｅ3 氧化剂 ,氧化…     

利用氧化亚铁硫杆菌抗砷工程菌Tf—59（pSDX3）处理含砷金精矿

利用构建的氧化亚铁硫杆菌抗砷工程菌对含砷金精矿进行了有关试验，结果表明：含有抗砷质粒的氧化亚铁硫杆菌Ｔｆ－５９（ｐＳＤＸ３）的生长和产酸能力不低于对照菌Ｔｆ－５９加入硫酸亚铁和提高接种量可明显缩短生长延迟期，并加快脱砷速度；可将矿浆浓度从２０％提高到３０％，抗胂试验显示，当ｃ（ＮａＡｓＯ２）达到８０ｍｍｏｌ／Ｌ时，Ｔｆ－５９的生长受到严重预制，而对Ｔｆ－５９（ｐＳＤＸ３）的生长影响较少，说明Ｔｆ＝     

抗砷载体的构建及在氧化亚铁硫杆菌中的表达

利用ＤＮＡ体外重组技术，将抗砷质粒ｐＵＭ３经ＨｉｎｄⅢ酶切后得到的４．３ｋｂ抗砷片段克隆到有广泛寄主的ＩｎｃＱ质粒ｐＪＲＤ２１５的ＨｉｎｄⅢ位点上，构建了一个新的抗砷质粒ｐＳＤＸ３。砷抗性研究表明，在大肠杆菌中，ｐＳＤＸ３的抗砷水平与ｐＵＭ３相近。将ｐＳＤＸ３通过接合的方式引入氧化亚铁硫杆菌Ｔｆ－５９中并得到了表达，与对照相比，含质粒ｐＳＤＸ３的Ｔｆ－５９抗砷水平有了很大的提高。     

多能硫杆菌1,5—二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶的酶学特征及…

从固体平板的生长情况及ＲｕｂｉｓＣｏ酶活性测定结果，表明多能硫杆菌是通过卡尔文循环固定的Ｃ为蔗糖或糊精有该循环的关键酶－１，５－二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶，进一步将我能硫杆菌染色体ＤＮＡ用各种限制性内切酶酶切，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转移到硝酸纤维滤膜上，与光合Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓＣ基因探针杂交，显示出杂交带型，说明多能硫杆菌具有Ｒ．ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ同源的羧化酶基因，并初步     

氧化亚铁硫杆菌基因转移系统研究进展

Thiobacillus ferrooxidans is a extremely acidophilic and obligately chemlithotrophic bacterium. It is the most important work for gene engineering of T.ferrooxidans to develop an efficient gene transfer systems. This paper summarized the genetics background of T.ferrooxidans, the process of establishing such a kind of gene transfer system, and its application in constructing arsenic resistance genetically engineered bacteria. Ref 22