川牛膝多糖的体外免疫活性研究

通过体外细胞毒性检测、小鼠脾淋巴细胞增殖实验、NK细胞活性测定以及腹腔巨噬细胞吞噬巾性红等实验,对川牛膝多糖的免疫活性进行了研究.研究结果表明,川牛膝多糖体外在10～300 pg/mL浓度范围内对细胞不具有直接毒性作用,能够促进B淋巴细胞增殖(P0.05).因此,川牛膝多糖既具有体液免疫功能,又能提高NK细胞活性和小鼠巨噬细胞的吞噬能力,表明其免疫活性广泛.     

白藜芦醇对血管生成的抑制作用

研究了白藜芦醇在体外和体内实验中抗血管生成的活性 .研究发现 ,白藜芦醇在体外实验中能明显抑制ECV30 4细胞的增殖 (作用 4 8h的IC50 是 5 9.4 μgmL-1,作用 72h的IC50 为 32 .0 μgmL-1)和迁移 (IC50 为 1.6 μgmL-1) .在其作用下 ,ECV30 4细胞在胶原凝胶上形成管腔样结构的数目明显减少 (IC50 为 39.1μgmL-1) .白藜芦醇在发挥抑制作用的有效浓度范围内无明显的细胞毒性 .在体内实验中 ,白藜芦醇能明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜新血管的形成 .图 1表 3参 10     

黄精多糖乳膏治疗单纯疱疹性豚鼠阴道炎的疗效研究

三种浓度(0．5％，1．5％，5％)的黄精多糖乳膏能明显治疗单纯疱疹病毒性豚鼠阴道炎，用药组豚鼠的外阴病变积分值显著低于模型对照组，这三种浓度的黄精多糖乳膏能治疗单纯疱疹病毒引发的豚鼠外阴红肿、溃破等病变，并能降低患病豚鼠的死亡率，其中以1．5％浓度乳膏的疗效相对较好．各浓度试验组黄精多糖乳膏并能显著降低感染HSV—2 Sav strain病毒的豚鼠阴道分泌物中病毒的毒力．临床预试验表明，1．5％黄精多糖乳膏与3％无环鸟苷乳膏疗效相近．图1表3参19     

栀子中京尼平甙对CCl4急性小鼠肝损伤保护作用的生化机理研究

预先给小鼠灌胃不同剂量的京尼平甙后,以四氯化碳造模,通过测定小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天氡氨酸氨基转移酶(AST)以及肝脏内GSH的含量并制作组织病理切片,研究了京尼平甙对四氯化碳肝损伤小鼠的保护作用,结果表明,京尼平甙能抑制四氯化碳肝中毒小鼠血清中ALT和AST的活性以及增加肝脏内GSH的含量.然后研究了京尼平甙对正常小鼠肝微粒体内细胞色素P4502E1和细胞色素P4503A活性的影响以及肝脏内谷胱甘肽(GSH)系统的影响,表明京尼平甙对正常小鼠肝微粒体内CYP4502E1具有明显的抑制作用,并能增强肝脏内谷胱甘肽还原酶(GR)以及谷胱甘肽-S-转移酶活性.以上3个酶与自由基形成以及清除有关.图1表3参16     

核桃青皮提取物的抗菌和抗氧化活性

用不同极性的试剂提取核桃青皮成分,用牛津杯法测定各成分抗菌能力,并从总酚含量、DPPH自由基清除能力、还原能力3个方面测定抗氧化能力.结果显示,核桃青皮不同提取物对不同病源菌有不同的抗菌活性,其中乙酸乙酯提取相和氯仿相对试验细菌的抗菌活性较强,乙酸乙酯相和氯仿相对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌作用MIC分别为6.25/6.25、6.25/1.56、3.13/3.13、6.25/3.13 mg/mL;极性较小的石油醚相对试验真菌有明显抗菌活性,石油醚相对青霉菌、绿霉菌、白色念珠菌的抗菌作用MIC分别为3.13、6.25、6.25 mg/mL;同时,核桃青皮各提取相也有不同程度的抗氧化能力,乙酸乙酯相和氯仿相总酚含量(以没食子酸的相当值GAE表示)、清除自由基能力EC50、还原能力EC50分别为193.52/174.64 mg/g、14.05/26.11μg/mL、34.70/44.60μg/mL,乙酸乙酯相和氯仿相抗氧化能力远远高于其他各相.研究证明核桃青皮提取物有着较好的抗菌和抗氧化活性,具有资源化利用前景.     

4种浮萍提取物的抗菌活性和黄酮含量

浮萍(Lemnaceae)生长在微生物丰富的污水表面,为了研究浮萍抗菌机制,为浮萍抗菌物质活性筛选以及动植物病原菌和人类致病微生物感染机制研究提供依据,用不同极性的溶剂对浮萍进行提取,牛津杯法(Oxford Cup)及最小抑菌浓度(MIC)测定比较绿萍zh0018、少根紫萍zh0224以及多根紫萍zh0003、zh0225四种浮萍提取物的体外抗菌活性,并用分光光度法结合高效液相色谱(HPLC)测定分析提取物总黄酮含量以及成分差异.结果表明:浮萍甲醇提取物、95%乙醇提取物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、农杆菌均有不同程度的抗菌活性,其中多根紫萍zh0225甲醇提取物抗菌活性最强(MIC:6.25 mg/mL),其次为绿萍;各萃取物中乙酸乙酯相活性最强(MIC:0.78 mg/mL),其次为正丁醇相.分光光度法测得绿萍甲醇提取物总黄酮含量较高,为提取物的9.8%,其次为少根紫萍甲醇提取物,为8.1%,其中多根紫萍zh0225乙酸乙酯相含量最高,为萃取物的22.46%,其次为正丁醇相,为17.2%.HPLC测得不同浮萍提取物黄酮成分差异较大,两株多根紫萍成分相似而含量不同.研究表明,结合浮萍自身的特性和提取物抗菌活性的大小及黄酮含量,筛选多根紫萍zh0225乙酸乙酯萃取相作为优良浮萍品种提取活性物质以及开展药物生产具有巨大潜力.     

川牛膝多糖硫酸酯的体外抗单纯疱疹病毒2型活性

从传统的川产道地中药材川牛膝中提取多糖RCP，用氯磺酸-吡啶法制备了它的硫酸酯衍生物s—RCP,产物经红外鉴定，证实RCP硫酸酯化后羟基部分被硫酸基取代，在1250cm^-1和810cm^-1处显示了硫酸基的特征吸收峰值,ω(S)=8．27％，取代度Ds=0．569．体外实验研究了RCP和S—RCP对非洲绿猴肾细胞(Vero cell line)的细胞毒性和抗单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的活性．细胞病变效应法(CPE)和MTT法结果表明RCP在6．0mg／mL以下，S-RCP在4．0mg／mL以下均无细胞毒性，RCP本身无抗病毒活性，经硫酸酯衍生后的S—RCP获得抗病毒活性，0．25—4．0mg／，mL的S—RCP能很好地抑制HSV-2引起的细胞病变,以0．5mg／mL的无环鸟苷(ACV)作为阳性对照，结果显示当S-RCP浓度为2．0mg／mL和4．0mg／mL时有显著的抗病毒作用，效果与阳性ACV相当．图1表8参20     

链霉菌S227抗耐药性物质的分离及其活性研究

在抗耐药性活性筛选过程中,发现分离自四川峨嵋山森林土壤的一株链霉菌S227(Streptomyces sp.)的发酵液具有抗细菌抗生素耐药性生物活性.利用已建立的抗耐药性的活性检测方法(专利号:ZL01128969.4)[1]为跟踪手段,采用有机溶剂萃取、硅胶柱层析以及薄层层析等方法,对该菌发酵液中抗耐药性活性物质进行分离纯化,得到了具有抗耐药性的活性单体S227-4,初步鉴定为四聚糖.利用MIC法对该样品的抗耐药活性进行研究:在证明该样品本身不具有抗菌活性的基础上,以临床分离的耐药菌株为指示菌,考察了该样品与抗生素联合使用时对耐药菌抗生素MIC(最小抑菌浓度)值的影响,结果表明,S227-4在不影响耐药菌生长的浓度下与不同的抗生素联合使用,可以明显提高不同耐药菌对不同抗生素的敏感性,如S227-4(200μg/mL)可以使S.aureus12334对红霉素的敏感性提高128倍.图2表2参8     

均匀设计法优化樟芝产三萜液体发酵条件

为在兼顾生物量的基础上提高液体发酵中三萜的百分含量,首先通过单因子试验筛选出最佳的碳源、氮源、无机盐,然后采用均匀设计(UD)对其培养基配比和培养条件进行优化试验,建立适当的数学模型,并对模型进行验证确定优化条件.单因子试验结果表明玉米淀粉既能促进菌丝体的生长,又能促进三萜的合成;麸皮虽然对菌体生长略有不利,但是对三萜的积累作用特别显著;硫酸镁对菌丝体生长效果不显著,但是对三萜的合成比较有利.均匀设计试验结果表明,菌丝体干重最大的培养条件和三萜的最优培养条件相差甚远.菌丝体干重的最优培养条件为:1 L培养液中玉米淀粉47 g,麸皮47 g,硫酸镁0.5 g,初始pH 3.0,培养7 d;三萜最佳培养基配方为:1 L培养液中玉米淀粉20 g,麸皮20 g,硫酸镁1.85 g,初始pH 3.0,培养16 d.菌丝体干重在最优条件下能达到15.58(±0.37)g L-1;三萜百分含量在最优培养条件下高达6.04(±0.03)%,三萜的百分含量比基础发酵结果和报道的最高发酵结果3.18%提高了90%,因此,均匀设计法能有效优化液体发酵培养条件     

黄精多糖的抗单纯疱疹病毒作用

体外抗单纯疱疹病毒试验表明：黄精多糖对非洲绿猴肾细胞（Vero cell）的最大4无毒浓度为16mg/mL。在对Vero细胞无毒性的浓度下对单纯疱疹病毒1型（Stoker株）和2型（333株和Sav株）均有显著的抑制作用，对Stoker株的半抑制浓度（IC50）为3.95mg/mL，最小有效浓度（MIC）为1.0mg/mL；对333株的IC50为8.0mg/mL，MIC为8.0mg/mL；对Sav株的IC50为7.72mg/mL，MIC为4mg/mL。MTT染色的结果表明，黄精多糖能显著提高病毒感染的Vero细胞的活力，对细胞有保护作用。图1表4参11。