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转化血型用蕃茄α-D-半乳糖苷酶的分离、纯化及理化性质 总被引:1,自引:0,他引:1
成熟蕃茄匀浆后,经硫酸铵盐析,DEAE-SephadexA-50离子交换层析,SepadexG-100凝胶过滤和Melibiose-Agarose亲和层析,获得了α-D-半乳糖苷酶(C.E.3.2.1.11)。酶制剂经PAGE检测为一条带;SDS-G-PAGE测得酶Mr为34000;比活力52.9U/mg·;提纯倍数为52901产率为45%.酶专-催化以α-D-半乳糖为末端a-(1,3)连接的糖苷键,以PNPG(对硝基苯-α-D-半乳糖昔)为废物,酶催化反应的Km=0.11mmol/L,Vmax为67μmol·mg1-·min-1.t稳定范是0~35℃;PH稳定范围是4.0~7.0.最适pH为5.1.半乳糖是酶的竞争性抑制剂;Cu2+、Zn2+、Mn2+、Fe3+、Ag+和EDTA对酶活性无影响.纯酶制剂可作为B型血向O型血转化的工具酶液. 相似文献
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