不同产地麻疯树种仁的含油量及脱油种仁的佛波酯含量

选用国内4种不同产地的麻疯树种仁,对其含油量以及脱油后的佛波酯含量进行了研究.采用GB/T 5512-85粮食、油料检验粗脂肪测定法进行麻疯树种仁含油量的测定;脱油后种仁经二氯甲烷超声提取佛波酯,采用高效液相色谱(HPLC)对其含量进行检测.结果表明,小金河、攀枝花、仁里、片角乡麻疯树种仁的含油量分别为58.29%、60.84%、58.83%和56.12%,脱油后种仁中佛波酯含量分别为2.43 mg g-1、2.25 mg g-1h、2.03 mg g-1和1.21 mg g-1.不同产地的麻疯树种仁含油量均有差异,在深入开发麻疯树资源时,种仁含油量的高低可作为其选种依据之一.4种不同产地的麻疯树种仁脱油后的佛波酯含最均高于无毒麻疯树品种,要利用麻疯树的脱油种仁这一潜在饲料资源,对其进行进一步脱毒处理是必要的.图3表3参10     

麻疯树脱油种仁的总生物碱:提取及酸性染料比色法含量测定

对不同产地麻疯树脱油种仁中的总生物碱进行提取,采用酸性染料比色法,以盐酸川芎嗪为对照品,于420 nm处测定总生物碱含量,并利用单因素法考察最佳提取条件.结果表明,盐酸川芎嗪在0.036～0.180 mg mL-1范围内线性关系良好(R2=0.999 9),平均加样回收率为98.19%,RSD为2.53%(N=6).7个不同产地麻疯树脱油种仁中总生物碱含量在3.817～4.467 mg g-1之间,其中四川攀枝花地区的总生物碱含量最高.该方法操作简便,准确可靠,重复性好,可作为麻疯树脱油种仁总生物碱的含量测定方法.     

西南部分地区麻疯树种子油的理化性质及脂肪酸组成分析

从西南6个地区采集了麻疯树种子并分析比较了其生物学性状和种子油的理化性质及脂肪酸组成.所有样品的百粒重范围为41.80~71.39g,出仁率60.02%~81.43%,种仁含油率51.76%~57.93%,种子含油率31.07%~47.17%,不饱和脂肪酸含量74.89%~79.68%.其中永胜产麻疯树的种子品质最好,其出仁率为81.43%,种仁含油率57.93%,种子含油率47.17%,不饱和脂肪酸含量79.68%.攀枝花和宁南产麻疯树的种子品质次之.双柏和罗甸麻疯树的种子油酸值为0.81,在所有样品(0.81~9.46)中最低.对麻疯树种子及种子油性质的相关数据进行方差分析,结果表明,产地不同,麻疯树种子的生物学性质、种子油理化性质和脂肪酸组成都有一些差异.图2表3参18     

麻疯树AFLP体系的建立与优化

为了建立麻疯树AFLP(Amplified fragment length polymorphism)反应体系及筛选出扩增条带丰富的引物,以17份来自不同地方的麻疯树的幼嫩叶片为试材,对影响AFLP分析的关键因素包括DNA的提取质量和浓度、MseⅠ/EcoRⅠ酶切反应时间和浓度、银染方法等进行了研究,从64对引物组合中筛选出适合麻疯树的引物.结果表明,改良的CTAB方法提取的DNA质量比较好.建立了一种适于麻疯树AFLP的优化体系:模板DNA的用量为400 ng,酶切反应时间为3 h,筛选出T8对适合麻疯树扩增条带多、多态性强的引物.最终建立了适用于麻疯树的AFLP反应体系,并筛选出适合麻疯树的引物,为今后利用AFLP标记技术进行麻疯树的遗传多样性分析提供了标准化程序.图5表2参15     

不同抗生素种类及浓度对麻疯树培养的影响

以麻疯树(jatropha ctrcas)的子叶、真叶、根及其对应的愈伤组织作为实验材料,研究各种抗生素对其生长的影响;在MS培养基中添加不同浓度和不同种类的抗生素,比较其对麻疯树不同外植体及对应愈伤组织生长的影响.方差分析和总体观察的结果表明,用于筛选转化植株的最佳抗生素是卡那霉素,其最佳抗性筛选浓度范围为10～25mg/L.表9参10     

酶联免疫吸附法测定麻疯树核糖体失活蛋白

建立了一种检测麻疯树核糖体失活蛋白(Curcin)的简便、快速的酶联免疫吸附测定法(ELISA).ELISA条件优化试验结果显示:最佳条件为costar酶标板在紫外线下照射45 min后进行包被;抗原最适稀释度为1:640倍(2.5μg/mL);curcin抗血清最适稀释度为1:12 800倍;2%封闭用山羊血清封闭120 min;二抗最适稀释度为1:5 000倍.在此试验条件下检测curcin含量,得到回归方程y=31.722x+106.88,相关系数R2=0.993 3.Curcin浓度在0.08～11μg/mL之间,曲线呈良好的线性关系.本方法的最低检测限为0.08μg/mL.高、中、低3个浓度的添加回收率分别为95.56%、102.27%、98.40%,平均回收率为98.74%.板内和板间的平均变异系数分别为4.78%和6.71%.Curcin抗血清与2种大戟科同类蛋白均无交叉反应.利用本方法成功检测了麻疯树种仁及脱毒饼粕中的curcin含量.     

麻疯树叶绿ω3脂肪酸脱饱和酶基因的克隆和鉴定

根据几个已知的植物ω3脂肪酸脱胞和酶基因序列,利用RT-PCR和RACE技术从麻疯树中克隆了一条编码叶绿体ω3脂肪酸脱饱和酶的cDNA序列.对该序列的分析表明,该cDNA的编码区长1 368bp,编码一个长度为455个氨基酸的蛋白质,推测的蛋白质相对分子质量(Mr)大小为52.1×103.同源分析显示,推测的氨基酸序列与其他物叶绿体脂肪酸脱饱和酶具有很高的相似性.RT-PCR分析表明,该基因在麻疯树叶片中有着稳定的表达.此外,还通过酵母表达系统鉴定了该基因编码的酶的功能.对转基因酵母的脂肪酸组成分析发现,α亚麻酸在转基因酵母中积累.上述结果表明,该麻疯树cDNA编码了一个叶绿体ω3脂肪酸脱饱和酶.     

麻疯树对铅胁迫的生理耐性研究

通过盆栽试验研究土壤中不同浓度（0、200、400、800、1 600和3 200 mg.kg-1）Pb胁迫对麻疯树生长、Pb吸收及相关生理指标的影响。结果表明,当土壤w（Pb）≥800 mg.kg-1时,麻疯树生长受到明显抑制;麻疯树植株不同部位Pb含量随土壤Pb浓度的升高而增加,且各部位Pb含量从高到低依次为根、叶和茎;当土壤w（Pb）≥800mg.kg-1时,麻疯树叶中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性,以及可溶性糖、脯氨酸和酸溶性巯基（SH）含量均显著提高,而谷胱甘肽（GSH）含量仅在土壤w（Pb）为3 200 mg.kg-1时才显著增加;可溶性蛋白质含量随Pb浓度的增加呈倒＂W＂型变化,当土壤w（Pb）为400 mg.kg-1时,其含量最大;上述生理指标的变化可缓解重金属Pb对麻疯树的毒害。主成分分析结果表明Pb胁迫处理的聚类结果与各处理麻疯树生物量及生理指标的变化规律相吻合,POD活性和可溶性糖含量对缓解重金属Pb毒害的贡献较大。可见,麻疯树在Pb污染土壤修复中具有一定的应用前景。     

凉山州金沙江干热河谷麻疯树群落结构

运用群落学调查方法对凉山州金沙江干热河谷的麻疯树群落进行了调查,依据气候、立地环境、海拔等因子划分了19个群落类型,分析了其种类组成和群落结构特征,并对其分布格局进行了探讨.结果表明:麻疯树天然林以高郁闭林分为主,分枝多,大多旱从状生长,天然更新良好,该区域是麻疯树的适生区域.图1表4参12     

麻疯树种质资源遗传多样性的ISSR分析

采用ISSR分子标记技术对大戟科属麻疯树9个自然居群的遗传多样性水平和遗传结构进行了研究.用10个引物对9个居群共135个样品进行了扩增,共获得169条清晰的扩增位点,其中多态性位点164个.POPGENE分析结果表明,麻疯树居群具有丰富的遗传多样水平(多态百分率PPB=97.04%,Neis遗传多样性H=0.2357,Shannon信息指数I=0.3760).AMOVA分析表明,9个自然居群间遗传多样性出现了较大的遗传分化(Gst=0.5398)可能与其有限的基因流(Nm=0.4667)和遗传漂变有关;而居群内有限的遗传分化可能是由于麻疯树自交、近交占主导方式的繁育方式有关.并进行了麻疯树居群的聚类分析.图3表4参19     

麻疯树种子中佛波酯的提取及对菜青虫的杀虫活性

佛波酯是麻疯树种子中的主要毒性物质之一.麻疯树种子经乙醇浸提、液液萃取和柱层析,获得佛波酯富集物.以TPA为外标,通过高效液相色谱(HPLC)定量分析佛波酯的含量,同时检测其对菜青虫的毒杀和拒食活性.结果显示,富集物中佛波酯含量达到0.817 35 mg mg-1.佛波酯富集物对3龄菜青虫具有显著的毒杀和拒食活性:毒杀活性表现为胃毒作用,胃毒活性具有明显的剂量效应和时间效应,48、72、120 h的佛波酯半致死浓度(LC50)分别为73.86、16.99、5.26μg mL-1;24、48 h的非选择拒食中浓度(AFC50)分别为9.81、5.39μg mL-1.图3表3参24     

麻疯树胚乳愈伤组织诱导及其污染消除

经过比较分析各种消毒方法,获得了较为理想的麻疯树(Jatrophacurcas)胚乳愈伤组织,并动态观察其类型、形态特征、增殖速率和形态发生能力,为麻疯树胚乳植株再生及愈伤组织和细胞培养生产药用成分奠定了基础.以麻疯树成熟胚乳为外植体进行愈伤组织的诱导,测试0.4mg/L的分裂素(BA、KT与TDZ)与2.0mg/L的生长素(IAA、IBA、NAA与2,4D)搭配组合的诱导效果.结果表明,对胚乳愈伤诱导效果而言,2.0mg/L的2,4D效果最好,NAA的效果次之,IBA又次之,IAA的效果最差.BA和KT诱导效果差异不显著,TDZ的添加可促进胚乳愈伤组织的诱导.选择适宜的消毒剂(种类、浓度)和消毒(处理)时间对胚乳外植体的接种成功具有至关重要的作用.在本试验所采取的灭菌方式中,用70%酒精处理30s,然后用10%NaClO处理25min,灭菌效果最佳,同时对胚乳外植体的生长影响最小.图3表1参23     

铁炭微电解法降解1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐

使用铁炭微电解法降解1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐([BMIM]PF6),并探讨了铁炭微电解法降解[BMIM]PF6的影响因素、工艺条件及其反应动力学.结果表明,影响铁炭微电解降解[BMIM]PF6的因素按从大到小的顺序为:炭铁比、pH、反应时间;铁炭微电解降解[BMIM]PF6的最佳工艺条件是:铁粉用量3g.l-1、水样pH2.5、炭铁比2、反应时间为60—90min;在此条件下,[BMIM]PF6的去除效率可以达到90%以上且该降解反应为三级反应.     

Solidification of arsenic and heavy metal containing tailings using cement and blast furnace slag

The objective of this study is to examine the solidification of toxic elements in tailings by the use of cement and blast furnace slag. Tailings samples were taken at an Au-Ag mine in Korea. To examine the best mixing ratio of tailings and the mixture of ordinary Portland cement (OPC) and blast furnace slag (SG) of 5:5, 6:6, 7:3, and 8:2, the 7:3 ratio of tailings and OPC+SG was adapted. In addition, the mixing ratios of water and OPC + SG were applied to 10, 20, and 30 wt%. After 7, 14, and 28 days' curing, the UCS test was undertaken. A relatively high strength of solidified material (137.2 kg cm?2 in average of 3 samples) at 28 days' curing was found in 20 wt% of water content (WC). This study also examined the leachability of arsenic and heavy metals (Cd, Cu, Pb, and Zn) under the Korean Standard Leaching Test, and it showed that the reductions in leachabilities of As and heavy metals of solidified samples were ranged from 76 to 99%. Thus, all the solidified samples were within the guidelines for special and hazardous waste materials by the Waste Management Act in Korea. In addition, the result of freeze-thaw cycle test of the materials indicated that the durability of the materials was sufficient. In conclusion, solidification using a 7:3 mixing ratio of tailings and a 1:1 mixture of OPC + SG with 20% of WC is one of the best methods for the remediation of arsenic and heavy metals in tailings and other contaminated materials.     

Cement-based solidification/stabilization of contaminated soils by nitrobenzene

The cement-based solidification/stabilization (S/S) of nitrobenzene (NB) contaminated soils, with cement and lime as binders, sodium silicate solution and powder activated carbon (PAC) as additives, was optimized through an orthogonal experiment, and S/S efficiency was estimated by both leaching test and volatilization measurement. The leaching test results showed that the factors affecting S/S efficiency were NB concentration, cement-to-lime ratio and binder-to-soils ratio, in sequence. With increasing curing time, the leaching concentration of NB between different levels of the same factor in the orthogonal experiment decreased, and less than 9% NB leached out from the 28 d cured samples. The volatilization measurement results indicated that 0.5‰ of NB was volatilized during the mixing and curing processes for the samples without PAC in the 28 d cycle, whereas adding 2 wt% and 5 wt% PAC, with respect to the weight of contaminated soils, could reduce NB volatilization to half of its original values either during the mixing or curing process. The optimizing formula, that is, contaminated soils (dry weight):cement:lime= 100:25:25, with 5 wt% additional sodium silicate and 2 wt% additional PAC, was applied to the engineering application of NB contaminated soils. Both the leaching test results of the product and the ambient air quality monitoring results met related regulations during the treating process.     

诺氟沙星(Norfloxacin)对蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)生长及抗氧化酶活性的影响

以蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)为实验材料,研究了喹诺酮类药物诺氟沙星(Norfloxacin,NFLX)对小球藻生长及抗氧化酶活性的影响.结果表明,NFLX对小球藻的96hEC50为30.78mg·L-1,属于低毒.NFLX暴露对小球藻谷胱甘肽硫转移酶(GST)和过氧化氢酶(CAT)具有显著影响,当NFLX浓度高于30mg·L-1时,小球藻GST活性受到显著诱导,并随NFLX浓度增加而显著升高,而小球藻CAT活性随NFLX暴露浓度的升高表现出先诱导后抑制现象.NFLX对谷胱甘肽(GSH)和7-乙氧基-异吩唑酮-脱乙基酶(EROD)的影响较弱.在低浓度NFLX暴露下,GST和CAT可作为NFLX暴露的生物标记物.     

硫化镉量子点与常规硫化镉对小鼠遗传毒性的比较研究

为比较硫化镉量子点(CdS quantum dots,CdSQDs)与常规硫化镉(CdS)对小鼠的遗传毒性作用,将30只昆明种健康雄性小鼠随机分为对照组、CdSQDs组和常规CdS组,通过经口灌胃法进行染毒,其中CdSQDs组和常规CdS组染毒剂量为100mg·kg-1,对照组为等体积的生理盐水.染毒35d后将小鼠处死,通过单细胞凝胶电泳观察外周血淋巴细胞DNA损伤情况,取小鼠一侧附睾观察精子畸形率,并取双侧肾脏做组织病理学检验.结果表明,与对照组小鼠比较,CdSQDs组和常规CdS组小鼠DNA损伤和精子畸形率均显著升高(p<0.05);CdSQDs组小鼠DNA损伤程度及精子畸形率均显著低于常规CdS组(p<0.05);组织病理切片观察显示,两种材料均可引起小鼠肾脏病变,但CdSQDs组小鼠病变程度明显轻于常规CdS组.以上结果提示,CdSQDs和常规CdS均会对小鼠产生一定程度的遗传毒性作用,但CdSQDs毒性低于相同剂量的常规CdS.