几株光合细菌的表型特征及DNA－NDA同源性分析

对５株新分离的光合细菌从形态、生理生化及ＤＮＡ－ＤＮＡ同源性等方面进行了研究．结果表明，菌株８与深红红螺菌（Ｐｈｏｄｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍｒｕｂｒｕｍ）的模式菌株ＡＴＣＣ１１１７０的ＤＮＡ－ＤＮＡ同源性为９７％，菌株３７与沼泽红假单胞菌（Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｐａｌｕｓｔｒｉｓ）的模式菌株ＡＴＣＣ１７００１的ＤＮＡ－ＤＮＡ同源性为８０％；菌株５５与球形红杆菌（Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ）的模式菌株ＡＴＣＣ１７０２３的ＤＮＡ－ＤＮＡ同源性为７１％；菌株４０和５２分别为另外两个ＤＮＡ同源群．根据各菌株形态、生理生化等表型特征以及ＤＮＡＧ＋Ｃｍｏｌ％和ＤＮＡ－ＤＮＡ同源性分析结果，确定了几株光合细菌的分类地位．     

几株光合细菌的气体代谢及对产甲烷细菌甲烷生成的影响

三株分别属于光合细菌三个主要类群（紫无硫细菌、紫硫细菌和绿硫细菌）的菌种和两种产甲烷细菌进行了混合培养试验，结果表明，自养生长的光合细菌减少了产甲烷菌有ＣＨ４生成，而异养生长时紫无硫细菌Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｌｏｍｏｕｓ ｐａｌｕｓｔｒｉｓ能利用乙酸放出ＣＯ２供产甲烷菌利用。在光照厌氧条件下，三株光合细菌的生长培养物和静止细胞都能利用有机酸产氢，有时还伴随着ＣＯ２产出。同时试验了不同ｐＨ值、温度和光照     

紫云英根瘤分离菌株质粒多样性的研究

从广东、广西、湖南、湖北、江西、浙江、江苏７省紫云英（ＡｓｔｒａｇａｌｕｓｓｉｎｉｃｕｓＬ．）主要分布区４６个采集点的紫云英根瘤中分离到１０１个菌株．检测发现有１６种不同质粒类型,所含质粒１～４个不等,含两个质粒的菌株占绝大部分,质粒Ｍｒ为３６×１０６～３６４×１０６．用克隆Ｍ．ｈｕａｋｕｉ７６５３Ｒ的ｎｏｄＤＢＣ４．２ｋｂ片段为探针（α３２ｐｄＣＴＰ）进行的分子杂交结果表明,所有这些菌株均含有共生质粒,通常为第一大质粒,但Ｃ、Ｌ、Ｍ、Ｎ和Ｏ型为第二大质粒,共生质粒Ｍｒ在１３１×１０６～３６４×１０６之间．比较质粒类型与１６Ｓ２３ＳｒＤＮＡＩＧＳ（ｐＨｒ,ｐ２３ＳＲ０１）ＰＣＲＲＦＬＰ分析结果表明,ＩＧＳ类型不同,即使在同一植株分离所得的根瘤其质粒类型常不同,但在同一植株上分离菌株的质粒类型相同,则其ＩＧＳ常表现相同．表明质粒的类型是细菌染色体背景和细菌外环境（如共生条件等）共同作用的结果     

不同菌源的微生物对邻苯二甲酸二甲酯生物降解性的比较

从处理石化厂废水的活性污泥中分离出１ 株邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１（ 荧光假单胞菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ Ｆ Ｓ１） ,从处理焦化厂废水的活性污泥中分离出２ 株邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ２（ 铜绿假单胞菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎａｓａ Ｆ Ｓ２） 和 Ｆ Ｓ３（ 短杆菌 Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ ． Ｆ Ｓ３） ． 研究了邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１ , Ｆ Ｓ２ 和 Ｆ Ｓ３ 对邻苯二甲酸二甲酯（ Ｄ Ｍ Ｐ） 的最适降解条件,比较了其降解特性． Ｆ Ｓ１ 、 Ｆ Ｓ２ 和 Ｆ Ｓ３ 最适酸度分别为ｐ Ｈ６ ．５ ～８ ．０ 、ｐ Ｈ７ ．０ ～８ ．０ 和ｐ Ｈ７ ．０ ～８ ．０ ,温度为２０ ～３５ ℃、１５ ～３５ ℃和１５ ～３５ ℃．邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１ 、 Ｆ Ｓ２ 和 Ｆ Ｓ３ 对邻苯二甲酸二甲酯的降解的半寿期： Ｆ Ｓ１ ＜ Ｆ Ｓ２ ＜ Ｆ Ｓ３ ,邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１ 是一株高效的邻苯二甲酸二甲酯降解菌     

苏云金芽孢杆菌无质粒突变株BMB171的转化和表达性能

研究了苏云金芽孢杆菌无质粒突变株ＢＭＢ１７１的转化性能和表达ｃｒｙ１Ａｃ和ｃｒｙ１Ｃａ基因的性能．用ｐＨＴ３１０１、ｐＢＭＢ３０５、ｐＢＭＢ１７３６、ｐＢＭＢ６７１、ｐＢＴＬ１和ｐＨＶ１２４９等６种外源质粒电转化无质粒突变株ＢＭＢ１７１,其转化频率分别是Ｂｔ４Ｑ７、Ｂｔ４Ｄ１０和Ｂｔｉ．ＩＰＳ．７８／１１等３种常用受体菌相应最高转化频率的１０００、６．７、１２．５、６６．７、３５００和２倍,其每μｇＤＮＡ的最高转化子数达１０７．导入ＢＭＢ１７１的外源质粒的稳定性与其复制子类型和质粒大小有关．无质粒突变株ＢＭＢ１７１表达ｃｒｙ１Ａｃ基因的表达量高于对照受体菌Ｂｔ４Ｑ７,略低于Ｂｔ４Ｄ１０和Ｂｔｉ．ＩＰＳ．７８／１１,而ＢＭＢ１７１表达ｃｒｙ１Ｃａ基因的表达量高于这３种受体菌;对小菜蛾３龄幼虫和甜菜夜蛾初孵幼虫的毒力测定结果表明,ＢＭＢ１７１表达ｃｒｙ１Ａｃ基因的杀虫毒力高于Ｂｔ４Ｑ７和Ｂｔ４Ｄ１０,略低于Ｂｔｉ．ＩＰＳ．７８／１;而表达ｃｒｙ１Ｃａ基因的毒力高于这３种受体菌     

邻苯二酚1,2-双加氧酶(C12O)基因的定位、克隆和表达

射性同位素标记ｔｆｄＣ基因片段作探针,Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交定位Ｌ１菌株的邻苯二酚１,２双加氧酶基因位于ＰｓｔⅠ的Ｉ片段和ＢａｍＨⅠ的Ｍ和Ｎ片段．低熔点琼脂糖回收ＰｓｔⅠ的Ｉ段,直接克隆至表达载体ｐＫＴ２３０上,获得重组子ｐＫＴ２３０ｐ．重组子转化不具开环酶活性的甲胺磷降解菌Ｐ２,获得高效的Ｃ１２Ｏ酶活     

安徽沿江地区4种蛇的染色体组型、C带和Ag-NORs研究

本文报道游蛇亚科４种蛇的核型、Ｃ带和ＡｇＮＯＲｓ,结果：黄链蛇２ｎ＝４６．虎斑游蛇２ｎ＝４０,第４号染色体（Ｎｏ．４）有随体．鸟梢蛇和紫灰锦蛇２ｎ＝３６,鸟梢蛇的Ｎｏ．５短臂近着丝粒区有一次缢痕．虎斑游蛇Ｎｏ．５为性染色体,其余３种的性染色体为Ｎｏ．４．这４种蛇均为ＡＦ＝５０;Ｃ带型的种属性特征明显,其中紫灰锦蛇的端粒型Ｃ带特别发育,其余三种以着丝粒Ｃ带较发达．黄链蛇、虎斑游蛇和紫灰锦蛇的Ｗ染色体Ｃ带正染呈现整条异染色质化;银染结果４种蛇均只显示一对ＮＯＲｓ,但其分布不同,其中虎斑游蛇ＮＯＲｓ呈异态现象．文章讨论了核型的演化和次缢痕、ＮＯＲｓ及Ｃ带的关系     

用假单胞菌(PSEUDOMONAS SP.)E4-106生物转化苯丙酮酸生产L-苯丙氨酸研究

用从土壤中筛选的假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）Ｅ４１０６株细胞进行了转化苯丙酮酸生产Ｌ苯丙氨酸实验研究．结果表明，转氨反应最适温度３５～４０℃；该转氨酶可在ｐＨ７～１０范围内催化反应而活力变化不大；０．５％戊二醛处理细胞可降低其转氨酶活力；表面活性剂处理细胞或在反应液中加入Ｍｇ２＋能显著提高转氨反应速度；Ｌ天冬氨酸是转氨反应的最适氨基供体；底物转化率与底物浓度、氨基供体浓度有关．在此反应体系中，Ｅ４１０６菌株单位湿重细胞的转氨酶活力为１０３９Ｕ／ｇ；生成产物ＬＰｈｅ浓度为３２．２ｇ／Ｌ和５０．４ｇ／Ｌ时，苯丙酮酸摩尔转化率分别为９７．５％、８７．２％．生成产物用ＣＧＡ６８８大孔吸附树脂进行分离、纯化．目标产物经熔点、比旋光度、元素分析、红外光谱和纸层析分析，证实是ＬＰｈｅ．产物收率为８１．８％．     

微生物降解蔬菜残留农药研究

从富集培养物中筛选到以甲胺磷为唯一碳源生长的菌株ＮＭＪ５和以乐果为唯一碳源生长的菌株ＮＭＬ３，经鉴定分别为芽孢杆菌属（Ｂａｃｉｌｕｓｓｐ．）和假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）．它们利用甲胺磷、乐果生长的最适条件及在无机盐培养基中农药最大耐受浓度分别为ｐＨ７．５，ｔ＝３５℃，ρ＝１０００ｍｇ／Ｌ和ｐＨ７．５，ｔ＝３０℃，ρ＝２０００ｍｇ／Ｌ．在无碳基础培养基内单菌株培养８ｄ，５２４ｍｇ／Ｌ的甲胺磷好气降解４２．５％，厌气降解３５．９％，２５０ｍｇ／Ｌ的乐果好气降解５０．２％，厌气降解１６．４％．小区试验表明，ＮＭＪ５、ＮＭＬ３的菌液制剂对普通白菜的变种南农矮脚黄（Ｂｒａｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｓｐ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓＬ．ｖａｒ．ｃｏｍｍｕｎｉｓＴｓｅｎｅｔＬｅｅ）中残留的甲胺磷、乐果有明显的去除作用．     

六六六热解废渣中2,3,7,8—取代PCDDs和PCDFs的测定

采用ＨＰＬＣ和ＧＣ／ＭＳ法对六六六热解废渣中的ＰＣＤＤｓ和ＰＣＤＦｓ进行了测定，使用此种方法，于废渣中检出了所有２，３，７，８－取代的同系物。此外，还根据各ＣＤＤｓ，ＣＤＦｓ的毒性当量因子ＴＥＦｓ，计算了废渣的毒性当量ＴＥＱｓ，约为６１２－９２４μｇ／ｇ。分析表明，ＯＣＤＤ是含量最丰富的导构体，而１，２，３，４，６，７，８－ＨｐＣＤＤ，１，２，３，４，６，７，８－ＨｐＣＤＦ和１，２，３，４，７，８     

固定化微生物对养殖水体中NH_4~ -N和NO_2~--N的转化作用

采用聚乙烯醇 (PVA) (ρ=gL-1)的方法对沼泽红假单胞菌、诺卡氏菌和假丝酵母 3种菌株进行固定化 ,所得的凝胶颗粒机械强度好 ,经久耐用 .运用这 3种菌株的固定化细胞对养殖水体中NH 4 N和NO-2 N进行转化 ,其最适作用温度范围为 2 5～ 30℃ ,最适pH范围分别为 :6 .5～ 8.5 ,7.0～ 7.5及 5 .5～ 7.0 ,且对水质初始氮浓度有很强的适应性 .3菌株经固定化后 ,其对养殖水体中NH 4 N和NO-2 N的转化效率明显优于其游离细胞 .若将 3菌株按 2 :1:2组合成复合菌株并固定化 ,其对养殖水体中的NH 4 N和NO-2 N转化效果将更佳 .图 3表 3参 9     

由一株青霉菌产生的聚乙烯醇降解酶

从纺织污水活性污泥中筛选得到一株新型聚乙烯醇(PVA)降解酶产生菌,根据形态学特征鉴定该菌属于青霉属(Penicillium sp.),实验室编号WStt02-21.这是由霉菌产生PVA降解酶的首例报道.在考察了菌株WSH02-21基本生长和产酶特性的基础上,研究了营养条件对PVA降解酶合成的影响.通过对营养条件的单因素考察和正交试验,确定了最优培养条件为PVA 40 g L-1、葡萄糖3.0 g L-1、NH4Cl 8.0 g L-1、KH2PO4 2.0 g L-1、酵母膏1.0 g L-1、:MgSO40.5 g L-1。、CaCl2 1.0 g L-1、NaCl 0.02 g L-1、FeSO4·7H2O 0.02 g L-1,初始pH 6.4.其中PVA浓度是影响Penicilliumsp.WSH02-21合成PVA降解酶的最重要因素.采用最优化条件进行验证试验,PVA降解酶酶活(4.4 U mL-1)略高于正交试验中的的最高酶活(4.3 U mL-1).图7表2参11     

共生菌B1+B2聚乙烯醇降解酶活性优化研究

从PVA降解酶的角度对本实验室前期实验筛选到的共生菌B1 B2进行了研究.在考察共生菌的基本生长和酶活的关系以及PVA降解酶和氧化酶的关系后,研究了不同的营养条件对PVA降解酶活性的影响.通过对主要营养条件的单因素考察,设计正交实验,优化出影响PVA降解酶活性的最佳主要营养条件为酵母汁0.2gL-1、硝酸铵0.2gL-1、葡萄糖0.5gL-1.采用优化条件进行验证实验,PVA降解酶活性(1.61UmL-1)高于正交实验中的最高酶活(1.56UmL-1),研究结果对发酵生产PVA降解酶和提高该菌在PVA废水处理中的降解性能有一定的价值.图5表3参11     

螺孢菌ZG9901的筛选及其产碱性果胶酶发酵条件研究

用筛选培养基从芦苇土壤中筛选到７株碱性果胶酶产生菌株，经初筛选和复筛得到产酶活性较高的一株菌株ＺＧ９９０１，初步鉴定为螺孢菌属Ｓｐｉｒｉｌｌｏｓｐｏｒａ ｓｐｐ．最适摇瓶产酶条件是：果胶２０ｇ／Ｌ，乳糖２０ｇ／Ｌ，蛋白胨３ｇ／Ｌ，酵母膏４ｇ／Ｌ，ＫＨ２ＰＯ４１ｇ／Ｌ，ＭｇＳＯ４．７Ｈ２Ｏ０．０４ｇ／Ｌ，ＭｇＣｌ２０．２ｇ／Ｌ，ｐＨ９．０，３２℃培养３６ｈ达到产酶高峰。     

Agricultural waste from the tequila industry as substrate for the production of commercially important enzymes

Approximately 1 million tons of Agave tequilana plants are processed annually by the Mexican Tequila industry generating vast amounts of agricultural waste. The aim of this study was to investigate the potential use of Agave tequilana waste as substrate for the production of commercially important enzymes. Two strains of Aspergillus niger (CH-A-2010 and CH-A-2016), isolated from agave fields, were found to grow and propagate in submerged cultures using Agave tequilana waste as substrate. Isolates showed simultaneous extracellular inulinase, xylanase, pectinase, and cellulase activities. Aspergillus CH-A-2010 showed the highest production of inulinase activity (1.48 U/ml), whereas Aspergillus niger CH-A-2016 produced the highest xylanase (1.52 U/ml) and endo-pectinase (2.7U/ml) activities. In both cases production of enzyme activities was significantly higher on Agave tequilana waste than that observed on lemon peel and specific polymeric carbohydrates. Enzymatic hydrolysis of raw A. tequilana stems and leaves, by enzymes secreted by the isolates yielded maximum concentrations of reducing sugars of 28.2 g/l, and 9.9 g/l respectively. In conclusion, Agave tequilana waste can be utilized as substrate for the production of important biotechnological enzymes.     

一株降解苄嘧磺隆光合细菌的分离鉴定及其降解特性

从农药厂工业废水和污泥中富集分离到一株能降解苄嘧磺隆(Bensulfuron methyl)的光合细菌PSB07-6,根据分离菌株的细胞形态结构、活细胞光吸收特征、生理生化特征以及系统发育分析将该菌初步鉴定为沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris).高效液相色谱法(HPLC)测定该菌降解光合细菌培养基中苄嘧磺隆的能力,在pH为6.5的光合细菌培养基中培养5 d,对350 mg·L-1苄嘧磺隆降解率达25.03%.添加回收率为105%～112%.降解特性研究结果表明,该菌能以苄嘧磺隆为唯一碳源和氮源,降解最佳条件为30℃、pH6.5.     

Localization of RubisCO and sulfur in endosymbiotic bacteria of the gutless marine oligochaete Inanidrilus leukodermatus (Annelida)

 The chemoautotrophic potential of the two co-occurring larger and smaller bacterial endosymbionts of the gutless marine oligochaete Inanidrilus leukodermatus was determined using immunocytochemistry. An antibody directed against the Form I of ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (RubisCO), the key CO₂-fixing enzyme of the Calvin–Benson cycle, consistently labeled the larger symbionts. Electron microscopic spectroscopy showed that the larger symbionts contained sulfur in intracellular globules and to a lesser degree in the cytoplasm. The presence of RubisCO and sulfur indicates that the larger endosymbionts of I. leukodermatus are chemoautotrophic sulfur-oxidizing bacteria. In contrast, no RubisCO or sulfur was detected in the smaller endosymbionts of this host. Received: 28 September 1999 / Accepted: 29 May 2000     

Influence of glucose feeding on the ligninolytic enzyme production of the white-rot fungus Phanerochaete chrysosporium

The present work studied the influence of glucose feeding on the ligninolytic enzyme production of Phanerochaete chrysosporium in a nitrogen-limited (C/N ratio is 56/8.8 mmol/L) medium. Several sets of shaking flask experiments were conducted. The results showed that 2 g/L glucose feeding on the first day of the culture (24 h after the inoculation) simulated both fungal biomass growth and enzyme production. The manganese peroxidase (MnP) activity was 2.5 times greater than that produced in cultures without glucose feeding. Furthermore, the glucose feeding mode in fed-batch culture was also investigated. Compared to cultures with glucose feeding every 48 h, cultures with glucose feeding of 1.5 g/L (final concentration) every 24 h produced more enzymes. The peak and total yield of MnP activity were 2.7 and 3 times greater compared to the contrast culture, respectively, and the enzyme was kept stable for 4 days with an activity of over 200 U/L.