产富马酸酶菌种筛选及固定化细胞生产L-苹果酸转化条件研究

从土样中筛选得到２０支可将富马酸转化为Ｌ－苹果酸垢细菌菌株。经摇瓶复筛，得到一株富马酸酶活力较高的ＺＧ－４菌株。以改性ＰＶＡ为载体，制备得到固定化细胞。其较佳转化条件为：１经ｍｏｌ／Ｌ Ｎａ２Ｆｕ为底物，ｐＨ７．０，４０转化。固定化细胞经胆酸ρ＝４ｇ／Ｌ或ＴＰＣρ＝０．６ｇ／Ｌ预处理后，可有效抑制琥铂酸副产物的生成。添加没食子单宁ρ＝１ｇＬ，可使富马酸酶比活力达１．９５ｍｍｏｌ ｇ＾－ｈ＾－。固定     

链霉菌碱性脂肪酶的研究

从杭州土壤中获得的一支链霉菌,通过ＵＶ、ＤＥＳ和Ｃｏ６０ － γ射线的５ 代诱变,选育成功了高产的Ｚ９４－ ２ 菌株,经过对Ｚ９４ －２ 的发酵研究,产碱性脂肪酶活力达５９６ ｕｍＬ,其最适培养基（λｕ Ｌ－１） 为：糊精１０、黄豆饼粉３０、尿素１０ 、Ｋ２ＨＰＯ４０ ．５、ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０ ．５、ＮａＣｌ１ 和ＡＥＯ９ ０．５ ,产酶的最适条件为：初始ｐＨ９．０～１０．０ ,２６℃培养４８ ｈ．对Ｚ９４－ ２ 与其他菌株的碱性脂肪酶的特性作了比较     

不同培养方式下兽疫链球菌发酵生产透明质酸的研究

对摇瓶的分批和补料、小罐的分批和流加发酵生产透明质酸（ＨＡ） 进行了比较研究,并对发酵机制进行了初步的探讨．在耗糖量相同的情况下,分批发酵比多次加料或流加发酵具有更高的ＨＡ产量和转化率;分批发酵初糖７％ ,发酵２４ ｈ 左右,产ＨＡ３．６ ｇ／Ｌ,转化率５．３ ％ ,流加发酵初糖３％ ,１５ ｈ 耗糖７％ ,此时,ＨＡ 为３ ．０ ｇ／Ｌ,转化率Ｙｐ／ｓ４．２％ ,继续发酵至２０ ｈ ,产ＨＡ４ ．０％ ,此时转化率Ｙｐ／ｓ３ ．６％ ,两种发酵所产ＨＡ 的Ｍｒ 均为２ ．０×１０６ ． 分批发酵中ＨＡ、副产物乳酸都和菌体生长相偶联,流加发酵中乳酸和菌体生长是偶联的,其含量均不断增加,ＨＡ含量表现为在菌体生长前期与之偶联,而后下降．流加发酵的菌体比生长速率远高于分批发酵．     

转化血型用蕃茄α－D－半乳糖苷酶的分离、纯化及理化性质

成熟蕃茄匀浆后，经硫酸铵盐析，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０离子交换层析，ＳｅｐａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ－Ａｇａｒｏｓｅ亲和层析，获得了α－Ｄ－半乳糖苷酶（Ｃ．Ｅ．３．２．１．１１）。酶制剂经ＰＡＧＥ检测为一条带；ＳＤＳ－Ｇ－ＰＡＧＥ测得酶Ｍｒ为３４０００；比活力５２．９Ｕ／ｍｇ·；提纯倍数为５２９０１产率为４５％．酶专－催化以α－Ｄ－半乳糖为末端ａ－（１，３）连接的糖苷键，以ＰＮＰＧ（对硝基苯－α－Ｄ－半乳糖昔）为废物，酶催化反应的Ｋｍ＝０．１１ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｖｍａｘ为６７μｍｏｌ·ｍｇ１－·ｍｉｎ－１．ｔ稳定范是０～３５℃；ＰＨ稳定范围是４．０～７．０．最适ｐＨ为５．１．半乳糖是酶的竞争性抑制剂；Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｆｅ３＋、Ａｇ＋和ＥＤＴＡ对酶活性无影响．纯酶制剂可作为Ｂ型血向Ｏ型血转化的工具酶液．     

二氯苯在盐水溶液中活度系数的研究

本文采用紫外分光光度法测定了２５．００±０．００１℃下间位和对位二氯苯在ＨＣＯＯＮａ,ＣＨ３ｃＯＯＮａ,（ＮＨ４）２ＳＯ４,ＭｇＳＯ４和Ｎａ２ＳＯ４水溶液中活度系数（ｆ）,它们的ｌｇｆ－Ｃ关系符合Ｓｅｔｓｃｈｎｏｗ盐效应公式。     

绿色木霉T-99株产纤维素酶的研究

从土壤中筛选获得一株产纤维素酶的优良菌株绿色木霉 Ｔ９９ ,采用固体培养产生纤维素酶,对培养基成分进行优化,并分析酶的理化性质,研究了稻草酶解的适宜条件．在最优培养条件下,产酶活力λ（ Ｆ Ｐ） ｍ － １ Ｄ Ｗ≈１２０ Ｕ／ｇ ,λ（ Ｃ Ｍ Ｃａｓｅ） ｍ － １ Ｄ Ｗ≈１１０ ～１２５ Ｕ／ｇ,λ（β Ｇａｓｅ） ｍ － １ Ｄ Ｗ≈９０ Ｕ／ｇ ,在５０ ℃,ｐ Ｈ４ ．０ ,底物浓度５ ％ ,酶解３６ ｈ 条件下,底物得糖率３３ ．４９ ％ ,全纤维转化率６１ ．３３ ％     

农药降解酶的固定化及其降解特性

采用海藻酸钙凝胶将 Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｓｐ ． Ｙ Ｆ１１ 农药降解酶进行固定化,并测定了固定化酶对杀灭菊酯的降解特性． 农药降解酶的固定化条件为：海藻酸钠质量浓度,３０ ｇ／ Ｌ;蛋白质量浓度,０ ．２ ｇ／ Ｌ;固定化时间ｔ ＝ １６ｈ ;粒径４ ｍｍ ． 固定化酶降解杀灭菊酯的最适ｐ Ｈ 为８ ．０ 、最适温度为３５ ℃, Ｋｍ５５ ．０ μｍｏｌ／ Ｌ     

用假单胞菌(PSEUDOMONAS SP.)E4-106生物转化苯丙酮酸生产L-苯丙氨酸研究

用从土壤中筛选的假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）Ｅ４１０６株细胞进行了转化苯丙酮酸生产Ｌ苯丙氨酸实验研究．结果表明,转氨反应最适温度３５～４０℃;该转氨酶可在ｐＨ７～１０范围内催化反应而活力变化不大;０．５％戊二醛处理细胞可降低其转氨酶活力;表面活性剂处理细胞或在反应液中加入Ｍｇ２＋能显著提高转氨反应速度;Ｌ天冬氨酸是转氨反应的最适氨基供体;底物转化率与底物浓度、氨基供体浓度有关．在此反应体系中,Ｅ４１０６菌株单位湿重细胞的转氨酶活力为１０３９Ｕ／ｇ;生成产物ＬＰｈｅ浓度为３２．２ｇ／Ｌ和５０．４ｇ／Ｌ时,苯丙酮酸摩尔转化率分别为９７．５％、８７．２％．生成产物用ＣＧＡ６８８大孔吸附树脂进行分离、纯化．目标产物经熔点、比旋光度、元素分析、红外光谱和纸层析分析,证实是ＬＰｈｅ．产物收率为８１．８％．     

Fe~(3 )、Mg~(2 )对跨界融合子Foaz中β-类胡萝卜素水平的影响

测定了由光合细菌 Ｐ９４７９ 株与酵母 Ｙ９４０７ 株经原生质融合构建的跨界融合子 Ｆｏａｚ 及其亲株在净化豆制品废水反应中０ 、０ ．１ 、５ ．０ 、１０ ．０ 、１００ ．０ ｍｇ／ Ｌ Ｆｅ３ ＋ 质量浓度和０ 、１５０ 、３００ 、４００ 、８００ ｍｇ／ Ｌ Ｍｇ２ ＋ 质量浓度下的β－类胡萝卜素色素含量及 Ｂ Ｏ Ｄ５ 去除效率．结果表明, Ｆｅ３ ＋ 对融合子 Ｆｏａｚ 及光合细菌中β－ 类胡萝卜素的合成有明显的促进作用,当ρ（ Ｆｅ３ ＋ ） 为５ ．０ ｍｇ／ Ｌ 时,融合子 Ｆｏａｚ 及光合细菌中β－ 类胡萝卜素的质量分数ｗ 达到最高水平,分别为４ ．９ ｍｇ／ｇ 和２ ．４ ｍｇ／ｇ ．而 Ｍｇ２ ＋ 对融合子及其亲株中β－ 类胡萝卜素的合成有一定抑制作用     

原生质体转化构建有机磷农药降解工程菌

降解有机磷农药甲胺磷、敌敌畏和对硫磷的菌株地衣芽孢杆菌 Ｐ１２（ Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ） 经溶菌酶处理获得原生质体,加入降解乐果的供体菌 Ｇ１ Ｄ Ｎ Ａ,经ρ（ Ｐ Ｅ Ｇ６ ０００） ＝ ３００ ｇ Ｌ－ １ 诱导,在液体再生培养基中振荡培养ｔ＝ ２０ ｈ ,使其恢复细胞壁后,离心收集菌体,涂布于含乐果的基础培养基上,经筛选得一转化子 Ｊ Ｐ Ｚ．其菌落形态明显不同于出发菌株,乐果平板连续传代１０ 次,性状保持稳定．在θ＝ ３０ ℃,１００ ｒ／ｍｉｎ 的培养条件下,３ ｄ 内对ρ（ 甲胺磷） ＝ ０ ．５ ｇ Ｌ－ １ ,ρ（ 敌敌畏） ＝ ０ ．２ ｇ Ｌ－ １ ,ρ（ 对硫磷） ＝ ０ ．１ ｇ Ｌ－ １ ,ρ（ 乐果） ＝ ０ ．３ ｇ Ｌ－ １ 的降解率分别为 Ｒｄ ＝ ７９ ．１ ％ ,４６ ．７ ％ ,２９ ．４ ％ 和４６ ．４ ％ ．     

漂白废水白腐菌脱色的条件

碳源、氮源、Mn^2 浓度及pH值对F7菌漂白废水脱色有较大的影响，最佳培养基组成为：ρ（葡萄糖）10g/L，ρ（NH4Cl）0．13g/L，ρ（Mn^2 )20mg/L，随葡萄糖和NH4Cl添国量的增加，菌体生物量增加，但高浓度的NH4Cl对F7菌脱色有抑制作用，F7菌适宜生长pH值为4－5，适宜脱色pHwfhgo 3-6,最适脱色pH值为5．0另外，经脱色处理的漂白废水的毒性明显下降。     

深黄伞形霉(Umbelopsis isabellina)华2-1产油发酵培养条件优化

为开发微生物油脂资源,从富含油脂的土样中分离获得一株产油脂微生物——深黄伞形霉(Umbelopsisisabellina)华2-1,油脂含量达48.60%.采用单因素和正交实验方法,对深黄伞形霉华2-1的发酵培养条件进行优化研究.优化的培养条件为:葡萄糖100 g/L,酵母粉3 g/L,接种量为20%,初始pH值为5.0～6.0,MgSO4.7H2O和KH2PO4的添加浓度分别为0.5 g/L和2 g/L,培养温度为31℃,最佳发酵培养时间为168 h.华2-1在优化发酵条件下可获得菌体生物量、油脂产量和油脂含量分别为45.86 g/L、24.47 g/L和59.53%,较优化前分别提高了21.48%、33.42%和22.49%.因此,深黄伞形霉华2-1作为微生物油脂生产的新资源具有广阔的应用前景.     

水体中氧化铁鞘细菌的分离鉴定及保藏

采用试管静止富集培养及生态模拟富集培养，结合平板划线、稀释涂布、平板滴加法，成功地从150份水样中分离到94株鞘细菌．利用Winogradsky液体试管法进行产铁氧化酶鞘细菌的快速初筛，从中筛选出24株产铁氧化酶能力较高的菌株，再经摇瓶复筛，获得产酶活性最高的菌株FC9901．采用多相鉴定方法对菌株FC9901细胞形态、培养特征、生理生化反应及各种碳源利用情况进行了研究，根据《伯杰氏细菌鉴定手册》第9版，把该菌株鉴定为第十四群鞘细菌类(sheathed bacteria)球衣菌属(Sphaerotilus)浮游球衣菌(Sphaerotilus natans)．对鞘细菌几种保藏方法进行比较研究，结果表明蒸馏水保藏法保藏时间长，是一种经济简便有效的保藏方法．图3表7参9     

青蒿无性系中青蒿素生物合成的相关因素

通过诱导丛生芽的方法得到青蒿高产无性克隆系S1,并用S1进行了青蒿素生物合成相关因素的研究 .发现在Hoagland培养液中添加 0 .4 4mg/L浓度的ZnSO4或者 5 .72mg/L的HBO3 时 ,能有效提高青蒿素的含量 .研究表明 ,青蒿素含量和青蒿各株系间的遗传差异存在很大关系 ,RAPD分析的结果表明 ,用OPA15能够在青蒿高产株系中扩增到OPA15 10 0 0 这一特异性片段 .另外 ,对青蒿素含量和青蒿生殖生长关系的研究表明 ,青蒿素含量最高的发育时期是现蕾期 .图 7表 1参 19     

Candida utilis生物合成谷胱甘肽的营养及环境条件

研究了摇瓶条件下Candida utilis WSH02—08生物合成谷胱甘肽(GSH)的营养条件，确定以葡萄糖作为碳源，硫酸铵和尿素作为混合氮源．在L6(4^5)正交试验的基础上，选用BP神经网络对营养条件进行优化和预测，得出较优的营养组合为：葡萄糖30gL^-1(NH4)2SO4gL^-1，尿素4gL^-1，KH2PO4 3gL^-1，MgSO4 0．25gL^-1．研究了GSH发酵的环境条件，得出较优的组合为：初始pH6．0，装液量30mL／250mL，接种量10％．利用优化后的营养及环境条件进行摇瓶发酵实验，结果表明，GSH产量和细胞干重均有较大幅度的提高．图7表2参13     

Optimization of fermentation process for saccharide-based fuel ethanol production by Saccharomyces cerevisiae北大核心CSCD

低成本、高产量的发酵工艺是实现工业燃料乙醇经济和环境可持续性发展的关键,而不需要重大基础设施改变或投资.为获得酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)利用甘蔗汁生产燃料乙醇的最优发酵工艺,首先对发酵体系的氮源条件进行优化;其次,在单因素试验基础上,以乙醇发酵效率为响应值,通过响应面法优化了燃料乙醇生产的发酵工艺,并通过补料分批发酵技术在5 L发酵罐中进一步扩大发酵.结果表明,以1.0 g/L (NH)SO和1.0 g/L酵母提取物作为发酵氮源,乙醇发酵效率和得率比对照可分别提高4.80%、9.52%.响应面设计获得的最优发酵工艺条件为在总糖浓度150.0 g/L、酵母提取物浓度2.0 g/L、发酵时间24.5 h、pH5.0、外加(NH)SO浓度1.0 g/L时,最高乙醇发酵效率可达到91.10%.在5 L发酵罐中采用补料分批发酵获得的最终乙醇浓度达到98.92 g/L,发酵效率维持在90%左右,乙醇生产力最高达到3.81 g Lh.本研究获得了一种高效生产糖质燃料乙醇的发酵工艺,可在较短时间内获得高浓度乙醇且消耗较少氮源,结果可为进一步利用糖质原料进行高效生物炼制及高浓度乙醇工业化生产提供参考.(图6表6参30)     

电解法处理含镍废水及纯镍的回收

采用电解回收法处理Ni2+含量为2g/L的废水,在阴极回收纯镍。研究了电解电流、极距、NH4Cl浓度、pH值等因素对Ni2+去除率、槽压、阴极能耗的影响,得出最优工艺参数为:温度20℃,电解时间20min时、电解电流300mA,极距15mm,NH4Cl浓度5g/L,pH值8.0,该条件下Ni2+去除率为96.926%,槽压16.21V,阴极能耗22.418kW.h/kg,在阴极可得到沉积6.45μm厚的镍板。     

聚乙烯醇-海藻酸钠固定香菇废弃物吸附Pb和Cd的最佳配方

选用香菇废弃物作为生物吸附剂,用聚乙烯醇(PVA)-海藻酸钠(SA)同定香菇粉制成PVA-SA固定香菇,以吸附溶液中铅(Pb)和镉(Cd)的能力为主要评价指标,结合成球性、机械强度和耐酸性等,通过正交试验确定出吸附Pb的PVA-SA固定香菇最佳配方是8%PVA+1%SA+3%香菇粉+2%CaCl2的饱和H3BO3,对Pb的吸附率为95.4%,吸附Cd的PVA-SA同定香菇的最佳配方是5%PVA+1%SA+3%香菇粉+2%CaCl2的饱和H3BO3,对Cd的吸附率为63.7%.二小球的成球性、机械强度和耐酸性都较好.Langmuir等温吸附模型能最好地拟合香菇吸附Pb的热力学过程,相关系数R2达0.993 9;Freundlich模型能更好地描述香菇吸附Cd的热力学过程,R2为0.999 3.Freundlich等温吸附模型适合描述PVA-SA同定香菇吸附Pb和Cd的热力学过程,R2分别为0.958 7和0.982 3.自由香菇对Cd的理论最大吸附量qm-Langmuir (2.832 1 mg g-1)小于PVA-SA固定香菇的理论最大吸附量qm-Langmuir (6.447 5 mg g-1),自由香菇吸附Pb的Freundlich模型参数k(0.312 7)小于PVA-SA固定香菇吸附Pb的k(0.431 0),香菇固定后吸附Cd和Pb的能力有所提高.PVA-SA固定香菇吸附Pb和Cd的吸附平衡时间分别为3 h和7 h,比自由香菇吸附Pb和Cd的平衡时间(1 h)长.伪二级动力学模型能很好地拟合固定香菇吸附Pb和Cd的动力学过程,R2分别为0.999 9和0.994 6,由该模型计算出的对Pb和Cd的平衡吸附量理论值分别为0.453 6 mg g-1和0.2060 mg Cd g-1.伪二级动力学模型能很好地拟合同定香菇吸附Pb和Cd的动力学过程,由该模型计算出的固定香菇对Pb和Cd的平衡吸附量理论值分别为0.453 6 mg g-1和0.206 0 mg g-1,自由香菇对Pb和Cd的平衡吸附量理论值分别为1.817 2 mg g-1和0.842 5 mg g-1.PVA-SA固定香菇吸附Pb/Cd的伪二级动力学反应速率常数k2为1.324 1/1.253 1,自由香菇吸附Pb/Cd的k2为0.780 510.213 0,自由香菇吸附Pb/Cd的k2大于固定香菇的k2,表明固定香菇吸附Pb/Cd达到平衡所需要的时间比自由香菇所需要的时间长.图3表6参16     

Microcystin-LR detection based on indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay

Microcystins (MCs) are a group of closely related toxic cyclic heptapeptides produced by common cyanobacteria, which cause lots of accidents and threatens human health. In this paper, an indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ic-ELISA) was established and used to detect microcystin-LR (MC-LR) in drinking and surface waters. The concentration of coating antigen was 5 μ/mL, the dilution of monoclonal antibody MC10E7 was 1:3 000, the dilution of enzyme tracer (goat anti-mouse IgG-peroxidase) was 1:3 000, the standard concentration of MC-LR ranged from 0.001 μg/L to 30 μg/L, and o-phenylenediamine was used as substrate. The assay showed high relativity with high performance liquid chromatography (HPLC) with a correlation coefficient of more than 99%. The relative standard deviation was less than 10%, the detection limit was achieved down to 0.01 μg/L and up to 5.1 μg/L. The quantitative detection range was from 0.03 μg/L to 3 μg/L, and the antibody had high specificity for [4-arginine] microcystins. It performed well in spite of the influence of the real samples.     

Effects of monospecific algal diets of varying biochemical composition on the growth and survival of Pacific oyster (Crassostrea gigas) larvae

Using monospecific diets of Thalassiosira pseudonana cells grown under different steady-state conditions, it was determined that higher growth rates of larval Crassostrea gigas Thunberg were obtained when fed T. pseudonana cells grown under high light. High light grown T. pseudonana cells consistently contained relatively more of the saturated fatty acids 14:0 and 16:0. Considered over three independent experiments, high light grown T. pseudonana cells were lower in protein and higher in carbohydrate than low light grown cells. Higher growth rates of larval C. gigas were obtained on diets with more of the essential fatty acid (EFA) 22:63, and less of the other EFA, 20:53. The relative requirements of C. gigas larvae for the essential fatty acids 20:53 and 22:63 are discussed. Faster growing larvae contained higher percentages of the fatty acids 14:0 and 16:0, and lower percentages of 22:2j. Oyster growth rates were correlated with their content of the fatty acids: 14:0, 16:0 and 22:2j in two experiments utilizing separately spawned batches of larvae. Fatty acid profiles are proposed as a technique for assessing larval condition. C. gigas larvae contained ten times the percent composition of the FAs 16:43, 18:17, 20:17 and 22:2j compared with their diet. Correlation analysis suggests that the dietary source of 18:17, 20:17 and 22:2j was 16:17. It is concluded that T. pseudonana cells grown under high light are a superior diet for C. gigas larvae in comparison with low light grown cells of the same species.