大豆栽培种和野生种豆类胰岛素的基因分析

以栽培大豆和野生大豆的基因组ＤＮＡ为材料,利用ＰＣＲ技术扩增并克隆了豆类胰岛素基因,分析了两者的ＤＮＡ序列．结果表明,测定的ＤＮＡ序列分别为８４１ｂｐ和９０３ｂｐ,有４个核苷酸差异;在信号肽编码区域内各存在一个内含子,大小分别为３６８和３７０个核苷酸;在ＯＲＦ范围内,与前人报导的ｃＤＮＡ序列分别有１个和２个位点的核苷酸差异,从而导致相应位点的氨基酸发生变化．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交表明,栽培大豆和野生大豆的豆类胰岛素基因分别以单拷贝和多拷贝形式存在于基因组中     

安徽省宣州扬子鳄饲养种群繁殖现状分析

对１９９３ ～１９９８ 年安徽省扬子鳄繁殖研究中心内的亲代与子代鳄的繁殖情况进行了统计研究,结果表明：扬子鳄亲代卵的平均受精率为（７５．６６±２．２９） ％ ,子一代为（６９ ．２４ ±５ ．１２） ％ ,经ｔ 检验,两者差异显著;亲代产卵孵化幼鳄的平均畸形率为（０．３０ ±０．２０） ％ ,而子一代产卵幼鳄平均畸形率为（１ ．８５±０．９５） ％ ,经ｔ 检验,两者差异显著．但受精卵幼鳄孵化率在两代间差异不显著．通过饲养种群的家系和有效群体大小分析,作者认为造成子代鳄的繁殖率下降和畸形率上升的原因与近亲繁殖有关．对扬子鳄的遗传保护研究提出了建议．     

几株光合细菌的表型特征及DNA－NDA同源性分析

对５株新分离的光合细菌从形态、生理生化及ＤＮＡ－ＤＮＡ同源性等方面进行了研究．结果表明，菌株８与深红红螺菌（Ｐｈｏｄｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍｒｕｂｒｕｍ）的模式菌株ＡＴＣＣ１１１７０的ＤＮＡ－ＤＮＡ同源性为９７％，菌株３７与沼泽红假单胞菌（Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｐａｌｕｓｔｒｉｓ）的模式菌株ＡＴＣＣ１７００１的ＤＮＡ－ＤＮＡ同源性为８０％；菌株５５与球形红杆菌（Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ）的模式菌株ＡＴＣＣ１７０２３的ＤＮＡ－ＤＮＡ同源性为７１％；菌株４０和５２分别为另外两个ＤＮＡ同源群．根据各菌株形态、生理生化等表型特征以及ＤＮＡＧ＋Ｃｍｏｌ％和ＤＮＡ－ＤＮＡ同源性分析结果，确定了几株光合细菌的分类地位．     

水稻新材料耐淹涝能力的比较研究

以“禾稗”ＤＮＡ导入后代及受体、供体为试验材料，应用地上部干重和根系干重的相对受害率（ＲＤ／％），叶片的电导率（ｋ）和膜脂过氧化物的产物丙二醛（ＭＤＡ）的增加量几个生长、生理指标，在苗期模拟没顶淹水处理２、４、６ｄ，比较研究了“禾稗”ＤＮＡ导入后代与供体、受体耐淹涝能力。结果显示：在淹涝胁迫下，“９４Ｄ－０５”、“９４Ｄ－３４”的干重ＲＤ／％分别小于它们的受 “科长早３号”和“圭６３０”，达到或接     

TW-80对污染土壤中菲和芘的生物降解影响

以 Ｔ Ｗ８０ 为供试物,进行了表面活性剂对污染土壤中菲和芘生物降解影响研究． 实验周期１５０ ｄ ．并分别在３０ ｄ 、６０ ｄ 和１５０ ｄ 间隔采样监测菲、芘降解率．结果表明,３０ ｄ 后,加入 Ｔ Ｗ８０ 的不同处理土壤中,菲的降解率分别达８１ ％ ～９８ ．９ ％ ,比 Ｃ Ｋ 高２２ ．０２ ％ 以上、芘的降解率分别达７１ ．９０ ％ ～８０ ．６６ ％ ,比 Ｃ Ｋ 高９ ．４６ ％ 以上．６０ ｄ 后,加入 Ｔ Ｗ８０ 的处理中,菲的降解率达８８ ．９４ ％ ～９６ ．５１ ％ 、比 Ｃ Ｋ 高１１ ．１４ ％ 以上; 芘降解率达９２ ．３９ ％～９４ ．０２ ％ ,比 Ｃ Ｋ 高２ ．２７ ％ 以上．１５０ ｄ 后,所有处理中,菲和芘的降解率均分别达到９８ ％ 和９６ ％ 以上, 与 Ｃ Ｋ 无明显差别．研究还发现, Ｔ Ｗ８０ 土壤中含有优势真菌常见青霉、蠕形青霉、淡紫青霉和顶孢头孢霉．它们可能是促进土壤中菲、芘降解的原因     

小麦矮秆基因Rht-B1b、Rht-D1b、Rht8的检测及其对株高的影响

为进一步明确矮秆基因对杂交后代的致矮能力,一方面利用分子标记对26份小麦材料中所含有的矮秆基因(Rht-B1b、Rht-D1b、Rht8)进行了检测,另一方面选取较矮的8份材料作为母本,与两个高秆地方品种(中国春、宜宾白麦子)进行杂交,测量F1代株高并计算致矮力;最后,结合两方面的数据来估计矮秆基因对株高的影响.结果表明,同一母本与不同父本,或同一父本与不同的母本,杂交后F1代株高存在较大差异.因此,各矮秆基因表达可能具有遗传背景效应.在与Rht8紧密连锁的分子标记Xgwm261位点扩增出了3个等位变异,分别为174 bp、192 bp和210 bp,其中210 bp片段所占比例最高,为57.7%.特别值得注意的是,检测到1份同时含Rht-B1b+Rht-D1b+Rht8的材料(川育925矮).由于其株高矮(57.92 cm),平均致矮力高(29.4%),具高抗条锈病,且其它综合农艺性状好,因此推荐作为小麦矮化、半矮化育种的主要亲本之一.     

侵染大豆的蚕豆萎蔫病毒研究

从杭州市郊的大豆病株上获得一病毒分离物Ｓ１,温室人工摩擦接种７科１６种植物,Ｓ１能侵染其中的５科１４种植物．Ｓ１能由桃蚜、豆蚜以非持久性方式传毒,该分离物的钝化温度为５０～５５℃,稀释限点为１０－３～１０－４,体外保毒期为３～４ｄ（２５℃）．用昆诺藜作繁殖寄主可提到大量球状病毒粒子,ｄ为２５～３０ｎｍ．病毒外壳蛋白主要由两种亚基构成,Ｍｒ分别为４４．７×１０３和２１．９×１０３,病毒基因组由两条ＲＮＡ分子组成,大小分别为６．２ｋｂ与３．８ｋｂ,Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结果显示３．８ｋｂＲＮＡ与ＢＢＷＶ２蚕豆分离物ＲＮＡ２ｃＤＮＡ有明显杂交反应．病毒粒子电泳后产生相似于豇豆花叶病毒科的快、慢两个电泳型．琼脂双扩散试验中,Ｓ１和ＢＢＷＶ２均能与蚕豆萎蔫病毒２（ＢＢＷＶ２）抗血清形成明显沉淀线,且沉淀线互相融合,Ｗｅｓｔｅｒｎ检测亦表明,此分离物的大小亚基均可与ＢＢＷＶ２抗血清反应．根据以上特性,Ｓ１分离物被鉴定为ＢＢＷＶ２．     

马氏甲烷八叠球菌S－6的一个染色体区段的表达、序列分析和结构分析

用一组多克隆抗体对马氏甲烷八叠球菌（Ｍｅｔｈａｎｏｓａｒｃｉｎａｍａｚｅｉ）Ｓ－６菌株的基因组ＤＮＡ文库进行了筛选．仅选出ｐ６０Ａ克隆能对马氏甲烷八叠球菌中可发生细胞形态学变化菌株的抗血清发生阳性反应．对ｐ６０Ａ克隆的双链ＤＮＡ进行了序列分析．识别出一开式阅读框架（ｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅＰ，ＯＲＦＰ）．表达的蛋白是ＯＲＦＰ编码的蛋白的３倍，并得到ＯＲＦＰ蛋白的三聚体，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中表现出整体蛋白的迁移行为．同时，此表达蛋白抗１０％ＳＤＳ，６ｍｏｌ／Ｌ尿素及热处理．基因结构分析表明，ＯＲＦＰ具有与Ｍ．ｂａｒｋｒｉｍｃｒＡ有同源性的核糖体结合位点和一个与甲烷细菌启动子共有序列相似度达７７％的启动子序列．使用参照序列分析表明，由ＯＲＦＰ演绎的氨基酸序列，具有高密度的带电荷的氨基酸和占优势的β－层迭构型．对此表达蛋白作了Ｎｅｕｒｏｓｒｏｒａｃｒａｓｓａ的ｐｏｒｉｎ蛋白抗血清试验，以研究其可能功能．检验了Ｍ．ｍａｚｅｉＳ－６细胞的蔗糖梯度制备物，对此原细胞中的ＯＲＦＰ蛋白作了定位．结果表明，ＯＲＦＰ蛋白可能是一种古细菌Ｐｏｒｉｎ，其在Ｍ．ｍａｚｅｉＳ－６中的表达，可能象大肠杆菌那样与渗透压调节有关．     

根际微生物耦合降解系统的构建及其对蒽污染土壤的修复

摘要将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的黄麻土生根际优势菌Tu-1B分别与葸高效降解菌An-2和生物表面活性剂产生菌P7-50进行原生质体电融合，得到两株具有荧光标记的融合子Tu-An和Tu-P．将二融合子接种于植物根际土壤，构建根际微生物耦合降解系统，：在40d时该系统的最大降解率为96％．对根际土壤中的Tu-An融合子进行了检测，结果表明融合子在根际能稳定旺盛生长．图3表4参18     

土壤温度和湿度对鲁东南杨树人工林土壤呼吸的协同影响

利用GXH．3051红外C02气体分析仪结合自制密闭箱对鲁东南中龄杨树人工林（MAP）和成熟杨树人工林（MP）土壤呼吸、自养呼吸和异氧呼吸进行了为期2a的定位研究,分析土壤温度和湿度与土壤呼吸的关系及动态变化,探讨土壤温度和湿度对土壤呼吸的协同影响。结果表明,（1）MAP和MP土壤呼吸具明显的季节特征,均呈单峰变化,7月达到高峰,分别为4．43和3．55μm01·m-2．s-1,1月处于低谷,分别为0．72和0．54tmaol·m-2．S-1。（2）土壤温度与土壤呼吸的关系可用指数模型R=ae加’进行拟合,土壤湿度与土壤呼吸的关系可用线性模型R=aW＋b进行拟合。（3）土壤温度和湿度与土壤呼吸的综合关系可用非线性模型R=aebrWc较好地拟合,共同解释了MAP和MP不同年份土壤呼吸、自养呼吸和异氧呼吸的83．3％－85．1％、71％－79．2％、58．6％－76．5％和82．4％－88．3％、68．9％－78．2％、50．2％－78．2％,双因素模型明显优于仅考虑土壤温度或土壤湿度的单因素模型,表明鲁东南杨树人工林土壤呼吸主要受土壤温度和土壤湿度的协同影响。     

浑河流域野生鲫鱼卵黄蛋白原基因表达

为揭示浑河流域水环境内分泌干扰物对水生态的潜在风险,利用兼并引物扩增获得鲫鱼卵黄蛋白原(Vtg)和核糖体蛋白L-7(RPL-7)基因部分碱基序列(分别为825和450bp),建立以RPL-7为内参基因、定量鲫鱼Vtg基因表达的实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法,并将该方法用于定量浑河野生鲫鱼肝组织Vtg基因表达分析。结果显示:与上游对照点(S1)相比,7月下游各点(S4～S8)雄鱼、S4和S6点雌鱼肝组织的VtgmRNA表达水平皆显著升高(P<0.05);11月在雄鱼中未检出VtgmRNA的有效表达,雌鱼也仅在S2和S3点的表达水平升高(P<0.05)。研究表明,浑河流域野生鲫鱼尤其是在7月明显受到了环境雌激素类物质的影响。另外,qRT-PCR方法能够灵敏检测出鲫鱼Vtg基因表达的时空差异。     

基于谷胱甘肽结合作用定量研究微囊藻毒素的解毒代谢机制

基于谷胱甘肽(GSH)解毒作用探讨了微囊藻毒素-RR(MCRR)在不同动物肝脏和肾脏合作下的代谢机制。通过人工合成MCRR的谷胱甘肽代谢物(MCRR-GSH),腹腔注射至鲫鱼和大鼠体内,利用液相色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)定量检测MCRR-GSH及其下游半胱氨酸代谢物(MCRR-Cys)在组织内的代谢动力学变化。在72 h的暴露实验中,实验组鲫鱼和大鼠体内均定量检测到MCRR-GSH和MCRR-Cys。MCRR-GSH在肾脏中的浓度显著高于其他组织(P0.05),鲫鱼和大鼠体内累积浓度分别是(0.161±0.001)和(0.116±0.005)μg·g~(-1)DW。同样的,MCRR-Cys主要分布于鲫鱼和大鼠的肾脏组织。鲫鱼肾脏中MCRR-Cys的浓度出现明显的波动,而肝脏和胆汁内的MCRR-Cys浓度却呈现出上升的趋势;大鼠肾脏内MCRR-Cys的浓度呈缓慢下降的趋势,浓度范围为(8.899±0.817)μg·g~(-1)DW至(3.336±0.263)μg·g~(-1)DW。基于以上结果推测,微囊藻毒素在肝脏和肾脏合作下的解毒过程为:MC在肝脏内经GSH结合作用生成的代谢物MC-GSH随血液循环转运至肾脏,在肾脏内MCGSH快速地转化为下游代谢物MC-Cys以促进排泄。     

Methylmercury, total mercury and total selenium in four common freshwater fish species from Ya-Er Lake, China

Snakehead fish (Ophiocephalus argus cantor), silver carp (Hypophthalmichthys molitrtix), crucian carp (Carassius carassius), and common carp (Cyprinus carpio) are four common freshwater fish species in China. In this study, the level of methylmercury (MeHg), total mercury (T-Hg), and total selenium (T-Se) in muscle samples of these four fish species from Ya-Er Lake, China, were analyzed using atomic fluorescence spectrometry coupled with high-performance liquid chromatography, and inductively coupled plasma mass spectrometry. The concentrations of MeHg in all the fish species were significantly correlated with those of T-Hg. Higher T-Hg and MeHg concentrations had accumulated in the snakehead fish, which is a strongly predatory fish, than in the other three species. The concentration ratios of MeHg and T-Hg in the muscles of these four fish species were almost equal. Conversely, there was negative correlation between the concentrations of T-Hg and T-Se, which implies that there is a competition between these two elements with respect to bioaccumulation. It is noteworthy that of all the muscle samples tested, the level of T-Hg exceeded the maximum allowable limit in fish [0.4 mg kg⁻¹ (w/w) recommended by the World Health Organization] in 38.46% of those of the silver carp, 18.18% of those of the crucian carp, and 100% of those of snakehead fish. These results show that the consumption of contaminated fish is a potential threat to human health and that necessary preventive measures to safeguard public health should be emphasized.     

烷基酚类化合物的联合雌激素效应

利用鲫鱼卵黄蛋白原诱导作用的雌激素效应研究烷基酚类化合物的联合雌激素效应,通过对鲫鱼血浆卵黄蛋白原含量的相对变化和化合物暴露浓度的非线性回归分析得出17β-雌二醇(E2)、辛基苯酚(PP)、壬基苯酚(p353-NP)及其等毒性同定比例混合物雌激素效应的剂量-反应关系,应用相加作用数学模型根据单个化合物的剂量反应关系可预测混合物效应,各化合物非线性回归分析结果均以Weibull函数拟合效果最好,决定系数R2分别为0.93,0.94,0.96和0.81,半效应浓度值EC50及其95%置信区间分别为0.092(0.080-0.107),63.89(53.90-71.26),152.61(140.11-168.38),11.11(8.54-14.00)μg·l-1;在各个浓度范围内,得出的混合物效应与通过浓度相加或反应相加模型计算得出的混合物效应有很好的一致性,而简单效应相加法得出的结果误差较大;表明了3种雌激素化合物呈现相加作用方式,在低于单个化合物的有效作用浓度下也会产生显著的混合物效应,效应大小取决于化合物的作用性质、暴露量和质量比例.     

Residual levels and health risk of polycyclic aromatic hydrocarbons in freshwater fishes from Lake Small Bai-Yang-Dian, Northern China

The residual levels of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in the liver, brain, gill and muscle tissues of four common edible freshwater fish species including crucian carp, snakehead fish, grass carp and silver carp collected from Lake Small Bai-Yang-Dian in northern China were measured by GC-MS. The distribution and composition pattern of PAHs in the fish tissues, and the effects of lipid contents in fish tissues and the octanol-water partition coefficient (Kow) of PAHs congeners on them were analyzed. The human health risk of PAHs though fish consumptions was estimated. The following results were obtained: (1) The average residual levels of total PAHs (PAH₁₆) on wet weight base in the different tissues of each fish species ranged from 4.764 to 144.254 ng/g ww. The differences in the average residual levels on wet weight base for PAH₁₆ within four fish species were not statistically significant (P > 0.05); however, these within four fish tissues were statistically significant (P < 0.01). (2) There were very similar distribution patterns of PAH congeners among both the fish tissues and the fish species, as indicated by statistically significant positive interrelationships (R = 0.58-0.97, P < 0.01 or P < 0.05). Low molecular weight (LMW) PAHs predominated the distribution in the fish tissues, accounting for 89.97% of total PAHs. Phe was the most dominant component, according for 37.79% of total PAHs, followed by Ant (18.59%), Flo (12.59%), Nap (10.79%), Fla (9.82%) and Pyr (6.43%). (3) The PAHs residues and distribution in the fish tissues are dependent on both the Kow of PAH congeners and the lipid contents in the fish tissues. There was a significant positive relationship (R = 0.7116, P < 0.0001) between lipid contents and PAHs residual levels. The statistically significant negative relationships (P < 0.05) were found between LogKow and log-transformed PAHs contents on wet weight base for all fish tissues except for the muscle tissue of snakehead fish, the brain and liver tissues of crucian carp. (4) The risk levels of total PAHs were lower than 10⁻⁵ for the muscle tissues of four studied fish species and for the brain tissues of grass carp and snakehead fish; while these were higher than 10⁻⁵ for the brain tissues of crucian carp and silver carp. The risk levels of total PAHs in the liver tissues of four studied fish species except for snakehead fish exceeded 10⁻⁵ for 2-4.5 times. However, the potency equivalent concentration (PEC) of total PAHs in four studied fish tissues were still lower than the maximum permissible BaP limits for crops and baked meat and for plants in the national criterions. The distributions of PAH congeners in fish were well simulated by a level III fugacity model, especially for low molecule weight PAHs.     

邻苯二甲酸二乙基己酯（DEHP）对金鲫鱼脑细胞DNA的损伤

为了研究邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)对金鲫鱼(Carassius auratu)脑细胞DNA的损伤作用,采用不同浓度的DEHP溶液(0、25、50、100、200mg·L-1)对体外培养脑细胞进行染毒,应用单细胞凝胶电泳(彗星实验)检测脑细胞DNA的损伤效应.结果表明,染毒1.5h后,与对照组相比,DEHP各染毒组细胞尾部DNA百分率(Tail DNA%)和尾矩(Tail Moment)均显著升高(p<0.01),即DEHP染毒引起了脑细胞DNA的严重断裂;随着DEHP浓度的增加,DNA损伤程度加剧,细胞尾部DNA百分率及尾距与DEHP染毒浓度呈明显的剂量-效应关系.以上结果表明,DEHP可导致金鲫鱼脑细胞DNA损伤。     

11种取代酚类内分泌干扰活性的初步筛选与评价

通过聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法，从鲫鱼(Carassius auratus)外周血中分离出淋巴细胞，体外培养24h，用MTT法测试双酚类、联苯酚类、二酚类、烷基单酚类和取代酚类等几类可疑环境内分泌干扰物对淋巴细胞增殖的影响．结果表明，双酚类、联苯酚类和烷基单酚类物质对鲫鱼淋巴细胞的增殖具有低浓度促进，高浓度抑制的作用．二酚类物质对鲫鱼淋巴细胞的增殖具有促进作用．取代酚类对鲫鱼淋巴细胞的增殖无明显作用．该结果表明，此方法可以对环境内分泌干扰物进行初步筛选，同时发现环境内分泌干扰物对淋巴细胞增殖的效应与物质的化学结构具有一定相关性。     

Bioconcentration of butyltin compounds by round crucian carp

Bioconcentration factors (BCF) by round crucian carp and partition coefficients between n‐octanol and water (Pow) were measured for dibutyltin, tributyltin and triphenyltin compounds. Pow was 0.97–3.66 for 7 organotin compounds. BCF of tributyltin and triphenyltin compounds was 1.70–2.77 for muscle, 1.70–2.66 for vertebra, 2.05–3.70 for liver and 1.49–3.50 for kidney.     

主养草鱼(Ctenopharyngodon idellus)池塘3种混养模式下氮含量的比较

对主养草鱼(Ctenopharyngodon idellus)池塘3种混养模式(模式Ⅰ,草鱼、鲢、鳙、鲫分别为250、35、40、15尾;模式Ⅱ,草鱼、鲢、鳙、匙吻鲟、鲫分别为250、35、20、20、15尾;模式Ⅲ,草鱼、鲢、鲫分别为250、35、15尾)水体和底泥中氮含量进行比较分析。结果表明,模式Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ水体TN含量均值分别为1.251、1.001和1.228 mg.L-1,NH4+-N含量均值分别为0.391、0.345和0.319 mg.L-1,NO3--N含量由高到低为模式Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ,NO2--N含量由高到低为模式Ⅱ、Ⅰ和Ⅲ。模式Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ底泥TN含量均值分别为0.793、0.910和0.963 mg.g-1,NH4+-N含量均值分别为0.005、0.006和0.004 mg.g-1。模式Ⅱ水体TN含量显著低于模式Ⅰ和Ⅲ(P<0.05),底泥中氮营养盐的转化也优于其他2种模式,可见模式Ⅱ最有利于水体中氮营养盐的转化和利用。     

滦河流域鲫鱼体内重金属分布及风险评价

采集滦河流域鲫鱼样本并分析重金属元素(Cu、Zn、Cr、Pb、As、Cd)在其体内的分布特征及食用风险。实验结果表明鲫鱼体内重金属含量由高到低顺序为ZnCrCuPbAsCd,蓄积器官主要为肝脏和鳃部,Cu和Cr主要蓄积在肝脏,Zn、Pb、Cd主要富集在鳃部,As的蓄积器官随地域变化,而且下游样本中各组织器官重金属含量下游高于上游。针对鲫鱼肌肉的评价表明,Zn、Cr、Pb含量超出《无公害食品水产品中有毒有害物质限量》(NY5073—2006)、《食品污染物限量》(GB2762—2012)和《食品中锌限量卫生标准》(GB 13106—1991)规定的标准限值,超出倍数依次为Cr(3.34)Pb(2.24)Cd(1.15)。基于目标危险系数法(THQ)评价结果表明鲫鱼肌肉组织单一重金属THQ值均小于1,As导致的健康风险最高,Cr最低;总风险系数(TTHQ)显示下游的溯河(TTHQ=1.263)与陡河(TTHQ=1.381)存在食用风险,风险比重较高的元素是As、Pb、Zn。