核桃粕中抗氧化和糖苷酶抑制活性成分

为了发掘核桃粕潜在的利用价值,提取核桃粕的化学成分,测定其抗氧化活性和糖苷酶抑制活性并进行活性跟踪.结果显示,95%乙醇提取物具有一定的生物活性,抗氧化能力用DPPH法测定自由基清除率来表示,测得IC_(50)为1.482 8 mg/m L,抑制糖苷酶的能力用α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性表示,测得IC_(50)分别为6.679 8 mg/m L和0.3572 mg/m L.为了得到活性物质的最大提取效率,分别选用95%乙醇、纯水、70%乙醇、60%丙酮4种溶剂提取样品,并从提取得率、抗氧化活性、糖苷酶抑制活性等方面进行评估,最后选用70%乙醇为最佳提取溶剂.对70%乙醇粗提物进一步分相萃取,结合柱色谱、薄层色谱结晶等分离方式,从乙酸乙酯相中得到化合物Y-10-1,其清除自由基IC_(50)为0.0372 mg/m L,抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶IC_(50)分别为0.017 9 mg/m L和0.617 3 mg/m L.抗氧化活性和糖苷酶抑制活性分别以维生素C和阿卡波糖作为阳性对照,测得阳性对照的抗氧化IC_(50)为0.100 2 mg/m L,α-淀粉酶抑制IC_(50)为1.462 mg/m L,α-葡萄糖苷酶抑制IC_(50)为0.165 1 mg/m L.经比较,Y-10-1的抗氧化活性和α-淀粉酶抑制活性均优于阳性对照.经液相和质谱鉴定,基本确定Y-10-1为没食子酸.本研究说明Y-10-1具有潜在的使用和开发价值.     

减压内沸腾和响应面分析优化苦荞总黄酮提取工艺

首次利用减压内部沸腾法结合响应面分析,优化苦荞(Fagopyrom esculentum)种子中的黄酮类化合物提取工艺.通过析因实验筛选,以提取压力、乙醇浓度、提取时间、提取温度为自变量,总黄酮得率为响应值,采用BoxBenhnken中心组合试验设计.结果表明最佳提取条件为:0.060 MPa,52℃条件下,用38%的乙醇,料液比1:16,提取5min,提取两次,总黄酮得率为2.65%.因此,采用减压内沸腾结合响应面分析方法,在保证苦荞总黄酮得率的同时,大幅降低了提取温度,缩短了提取时间,可为苦荞黄酮的进一步开发和工业化生产提供理论基础.表6图2参16     

苔藓植物光合色素含量测定方法--以暖地大叶藓为例

为了探讨苔藓植物光合色素含量测定方法的可靠性,设计了材料研磨或不研磨以及常见的80%丙酮和95%乙醇作为溶剂所组成的6个组合提取暖地大叶藓叶光合色素;并采用光谱比色方法,比较了所测定叶绿素a、b以及类胡罗卜素含量之间的差异.发现研磨是藓叶光合色素提取的必要步骤,而提取溶剂以95%乙醇最佳,明显优于目前广泛应用的丙酮.综合分析表明,95%乙醇提取并经研磨处理提取光合色素、光谱比色方法是苔藓植物光合色素含量测定的可靠方法.表1参11     

蚯蚓粪对铁皮石斛抗氧化能力及次生代谢产物的影响

在盆栽条件下使用不同含量蚯蚓粪的基质(蛭石)栽种一年生铁皮石斛(Dendrobium officinale),并在栽种的第15、30、45天时,分析石斛抗氧化能力和次生代谢产物含量的变化.结果表明:含有蚯蚓粪的栽培基质能提高铁皮石斛的超氧化物歧化酶(SOD)活力、过氧化物酶(POD)比活力、丙二醛(MDA)含量、根系活力、可溶性蛋白含量以及茎中黄酮和多糖含量(P0.05),蚯蚓粪含量不同效果有所差异.其中,蚯蚓粪含量为60%时,第45天石斛SOD活力和POD比活力较之对照分别增加了29%和156%;蚯蚓粪含量为80%时,在栽种45 d后石斛根系活力、可溶性蛋白含量以及多糖和黄酮含量较之对照分别增加了235%、37%、102%和97%;蚯蚓粪含量为20%、40%、60%和80%时石斛体内MDA含量均显著降低(P0.05).综上,人工栽培中使用适宜含量的蚯蚓粪能提升铁皮石斛品质,80%为提高其药用品质的最适含量,60%为提高其抗氧化能力的最适含量.     

铁皮石斛多酚和黄酮含量及与抗氧化活性的相关性

通过测试ABTS、DPPH和羟自由基的清除活性和还原能力,研究铁皮石斛不同极性提取物的体外抗氧化活性及其与多酚和黄酮含量的相关性.采用溶剂提取法制备4个不同极性铁皮石斛提取物(EE、CE、EAE、NBE),以Vc为阳性对照.结果显示,样品CE中总酚含量为40.96 mg/g,黄酮含量为104.48 mg/g,在各样品中含量最高.体外抗氧化实验显示,样品CE浓度为375μg/mL时对ABTS自由基的清除率达到100%,其IC50为88.82μg/mL;CE浓度为1 500μg/mL时对DPPH自由基的清除率达到78.45%,IC50为394.62μg/mL;CE浓度为1 500μg/mL时还原能力为62.29%,随浓度增大到3000μg/mL时还原能力达100%,其IC50为905.06μg/mL.相关性研究显示各提取物对ABTS、DPPH清除能力以及还原性与黄酮含量相关性较强,相关系数分别为0.845、0.902和0.994.而各提取物的还原能力及对羟自由基的清除能力与样品中的多酚含量明显相关,其相关系数为0.521.研究表明,铁皮石斛4个不同极性提取物均具有较强的体外抗氧化活性,且各提取物抗氧化活性与总酚含量和总黄酮含量之间有明显的相关性,表明铁皮石斛抗氧化活性的物质基础可能就是酚类或黄酮类成分.     

一株桃树内生真菌Pestalotiopsis vismiae N1培养条件优化与抗氧化、抗菌活性分析

对一株内生真菌韦司梅拟盘多毛孢(Pestalotiopsis vismiae)的培养条件进行探究,在此基础上进一步对其发酵提取物抗氧化、抗菌活性进行分析.通过测定菌丝的生长速度寻找菌丝培养适宜的温度、碳源、氮源和pH,并采用正交试验优化培养条件;通过测定菌株深层发酵液提取物对羟基和DPPH自由基的清除率以分析其抗氧化活性;通过测定菌株深层发酵液提取物对多种病原细菌抑菌圈大小的影响来分析其抗菌活性.结果表明,韦司梅拟盘多毛孢菌丝最适宜培养温度为25℃,在该温度培养条件下菌丝生长最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为酵母提取粉,最佳初始pH为6.5,这3种因素的显著性差异大小顺序为碳源氮源 pH;菌株深层发酵液提取物具有良好的抗氧化活性,其对羟基自由基和DPPH自由基清除率的EC50分别为1.19 mg/mL和0.56 mg/mL;菌株发酵液提取物对铜绿假单胞杆菌、金黄色葡萄球菌均具有一定的抑制作用;深层发酵液提取物抗氧化和抗菌活性具有一定的稳定性.本研究结果可为深入开发利用该真菌资源提供科学依据.(图12表3参26)     

4种浮萍提取物的抗菌活性和黄酮含量

浮萍(Lemnaceae)生长在微生物丰富的污水表面,为了研究浮萍抗菌机制,为浮萍抗菌物质活性筛选以及动植物病原菌和人类致病微生物感染机制研究提供依据,用不同极性的溶剂对浮萍进行提取,牛津杯法(Oxford Cup)及最小抑菌浓度(MIC)测定比较绿萍zh0018、少根紫萍zh0224以及多根紫萍zh0003、zh0225四种浮萍提取物的体外抗菌活性,并用分光光度法结合高效液相色谱(HPLC)测定分析提取物总黄酮含量以及成分差异.结果表明:浮萍甲醇提取物、95%乙醇提取物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、农杆菌均有不同程度的抗菌活性,其中多根紫萍zh0225甲醇提取物抗菌活性最强(MIC:6.25 mg/mL),其次为绿萍;各萃取物中乙酸乙酯相活性最强(MIC:0.78 mg/mL),其次为正丁醇相.分光光度法测得绿萍甲醇提取物总黄酮含量较高,为提取物的9.8%,其次为少根紫萍甲醇提取物,为8.1%,其中多根紫萍zh0225乙酸乙酯相含量最高,为萃取物的22.46%,其次为正丁醇相,为17.2%.HPLC测得不同浮萍提取物黄酮成分差异较大,两株多根紫萍成分相似而含量不同.研究表明,结合浮萍自身的特性和提取物抗菌活性的大小及黄酮含量,筛选多根紫萍zh0225乙酸乙酯萃取相作为优良浮萍品种提取活性物质以及开展药物生产具有巨大潜力.     

光照对芦丁稳定性及抑菌活性的影响

黄酮类化合物具有多羟基结构易被氧化,为了解其羟基被氧化后,是否还具有抑菌、抗癌等多种生物学活性,对芦丁光照处理前后的含量、抗氧化活性(清除DPPH.和还原能力)、分子结构以及抑菌活性进行了比较研究.结果表明,随着光照时间的延长,芦丁含量和抗氧化活性均呈下降趋势,降解反应属于一级反应,半衰期为187.3 d.结构鉴定表明,光照处理芦丁母核结构没有降解,只是A环5、7-OH和B环3′、4′-OH氢解离,芦丁在溶液中以负离子或自由基形式存在.芦丁氧化前后的浓度与抑菌效果均成良好的量效关系,其相关系数分别为0.933 2和0.933 0.但氧化芦丁的EC50值(15.58 g/L)与对照(6.34 g/L)相比差异显著(P<0.01).可见,氧化芦丁的抑菌活性明显降低.这进一步表明,芦丁分子结构的细微改变与体外的抗氧化活性和抑菌活性三者之间的构效关系基本一致.     

核桃青皮提取物的抗菌和抗氧化活性

用不同极性的试剂提取核桃青皮成分,用牛津杯法测定各成分抗菌能力,并从总酚含量、DPPH自由基清除能力、还原能力3个方面测定抗氧化能力.结果显示,核桃青皮不同提取物对不同病源菌有不同的抗菌活性,其中乙酸乙酯提取相和氯仿相对试验细菌的抗菌活性较强,乙酸乙酯相和氯仿相对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌作用MIC分别为6.25/6.25、6.25/1.56、3.13/3.13、6.25/3.13 mg/mL;极性较小的石油醚相对试验真菌有明显抗菌活性,石油醚相对青霉菌、绿霉菌、白色念珠菌的抗菌作用MIC分别为3.13、6.25、6.25 mg/mL;同时,核桃青皮各提取相也有不同程度的抗氧化能力,乙酸乙酯相和氯仿相总酚含量(以没食子酸的相当值GAE表示)、清除自由基能力EC50、还原能力EC50分别为193.52/174.64 mg/g、14.05/26.11μg/mL、34.70/44.60μg/mL,乙酸乙酯相和氯仿相抗氧化能力远远高于其他各相.研究证明核桃青皮提取物有着较好的抗菌和抗氧化活性,具有资源化利用前景.     

浮游植物叶绿素a测定方法比较

选取规范方法、超声波法、反复冻融法、延时提取法、热丙酮法、丙酮加热法、热乙醇法、混合溶剂法8种常见的浮游植物叶绿素a的测定方法,以实验室培养的微囊藻(Microcystis aeruginosa)水华样品为研究对象进行叶绿素a含量的测定.从叶绿素a提取的完全性、测定数据的稳定性、试验操作的简便性等方面对8种方法进行评价,并对叶绿素a结果测量的单色法和三色法进行分析讨论.试验结果表明,选取的8种测定方法中,包括国家标准方法在内的大多数方法,存在操作耗时长、过程复杂、叶绿素提取不完全的缺点;而丙酮加热法测量叶绿素a的提取效率高、数据稳定性好,操作耗时短、简便,可推荐作为一种常用的浮游植物叶绿素a的测量方法;三色法和单色法测定方法的选取应综合考虑.     

常温常压下水合肼对偶氮染料还原脱色反应

研究了在常压条件下,水合肼还原3种模拟偶氮染料废水并使其脱色,脱色效果用酶标仪测定,其结果表明,脱色效果较好,脱色率最高可达99%.对常压及不同温度条件下水合肼还原模拟甲基橙废水的脱色反应动力学行为及反应活化能进行了研究,结果表明,反应活化能Ea=59.236 kJ.mol-1.在常压条件下,反应符合一级动力学反应.反应产物用GC-MS、1H-NMR测定,并对反应机理进行了初步探讨.     

柠檬酸对3种常见水产病原菌的抑菌作用

选用嗜水气单胞菌、副溶血弧菌、荧光假单胞菌3种常见水产病原菌,用于测定柠檬酸的抑菌效果及最小抑菌浓度,并研究了柠檬酸抑菌作用的持续性。3种菌均为革兰氏阴性菌。试验结果表明,柠檬酸对3种菌都有不同程度的抑菌作用,并得到最小抑菌浓度,依次是:0.0011g/mL,0.0008g/mL,0.00125g/mL;在最小浓度下抑菌作用可达6d之久,柠檬酸抑菌效果有较好的持续性。     

秸秆污泥堆肥产纤维素酶细菌的筛选及产酶条件优化

从添加秸秆进行堆肥处理的污泥中采集样品,通过富集培养和刚果红平板染色法筛选分离出具有纤维素降解能力的细菌,再通过酶活力测定从中分离筛选出1株相对高活性的产纤维素酶细菌CI;通过基于16S rRNA基因序列的系统发育分析,初步确定该菌株为Devosia sp..利用单因素试验对目的菌株C1进行产纤维素酶发酵条件优化,结果表明菌株C1产纤维素酶的最佳发酵时间、培养温度、摇床转速以及最适初始pH值分别为60 h、30℃、130 r·min^-1和7.2～7.5,且在该条件下其滤纸酶（FPase）和羧甲基纤维素酶（CMCase）活力分别达23.10和54.97 U·mL^-1.     

一株乙醇利用菌的分离及其在乙醇含量测定中的应用

从山西清徐农用沼气池中分离得到一株能以乙醇为唯一碳源和能源生长的菌株ME45,通过生理生化特征及16S rDNA序列分析,将ME45鉴定为嗜有机甲基杆菌(Methylobacterium organophilium).依据ME45能在有氧条件下利用乙醇的特性,因此以固定化细胞和溶氧仪组成测定系统测定了不同含量乙醇的响应时间以及溶氧变化与乙醇含量的关系.结果表明,乙醇含量在0.02%～2%(V/V)范围内,响应时间小于25 min,溶氧消耗量同乙醇含量呈函数关系,拟合系数(R2)为0.9947.干扰实验结果表明,该测定体系具有较强的选择性,待测乙醇样品中其它醇类物质含量不高于乙醇含量5倍对乙醇测定无干扰.以95%乙醇为样品进行多次测定,测定平均值为91.8%,RSD为3.5%,表明该反应体系重现性良好.本研究为进一步研究乙醇微生物传感器奠定了基础.图7表1参15     

光催化复合氧化技术对环丙沙星和磺胺甲恶唑的深度处理

研究了光催化复合氧化技术对两种典型抗生素环丙沙星和磺胺甲恶唑的降解与矿化效果.用响应面法对所采用的复合氧化反应器进行运行条件优化,然后在优化所得的最优运行条件的基础上分别探究了pH值对CIP和SMX在该复合氧化体系中降解与矿化效果的影响.结果表明,降解受pH影响较小,CIP在中性条件下更易被矿化,SMX在酸性条件下更易被矿化.最后对CIP和SMX在该体系中降解所生成的中间产物进行抑菌活性分析,结果表明,水样中的抑菌活性分别在CIP和SMX的矿化率达到34.12%和13.04%时完全消失.     

抑制多重耐药致病菌的丹参内生真菌的筛选、鉴定及次生代谢产物分析

对四川道地药材丹参内生真菌的抑菌活性及其次生代谢产物进行研究,以期寻找出抑制多重耐药致病菌的新型抗菌物质.通过分离纯化丹参茎和叶中的内生真菌,得到145株菌株,将菌株发酵液分别进行普通致病菌(肠炎沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7和鼠伤寒沙门氏菌)和多重耐药致病菌(沙门氏菌耐药株、金黄色葡萄球菌耐药株和大肠杆菌耐药株)的抑菌试验,筛选得到3株具有显著抑菌效果的菌株.其中抑菌效果最显著的一株菌株S4,经形态学观察和18S rDNA序列分析确定其为Phomopsis sp.对S4发酵液的乙酸乙酯萃取相进行大类成分、LC-MS和GC-MS分析,结果显示发酵液中富含酚性物质、生物碱、对羟基苯乙醇等重要生物活性物质.本研究表明丹参内生真菌抑菌效果显著,富含活性物质,为耐药菌的控制提供了新的资源.表5图4参20     

桦木内生真菌的分离与代谢产物的抑菌活性

通过琼脂块法和滤纸片法,对白桦Betula platyphylla、棘皮桦B.dahurica、硕桦B.costata和柴桦B.fruticosa）的内生真菌产生抑菌物质的特性进行研究,结果表明分离自白桦3年生枝条的内生真菌拟茎点霉Phomopsis sp.BP103381表现出较强的抑菌物质形成能力。采用正交设计优化了BP103381的培养条件,在含有40 g/L蔗糖、3 g/L NaNO3、1 g/LMgSO4的改良查氏液体培养基中,在pH值6.5、28℃条件下发酵培养9 d,有利于抑菌活性物质的形成。BP103381产生的抑菌活性物质具有较好的温度稳定性,但是酸碱变化对抑菌物质的活性影响较大,BP103381产生的抑菌物质在pH为5.0~7.0时活性较强。     

氧化石墨烯纳米银复合材料的制备及其抗菌性

以柠檬酸钠为还原剂通过简单的超声加热处理,原位制备出氧化石墨烯纳米银复合材料.采用X射线光电子能谱、紫外可见吸收光谱、透射电子显微镜等手段对氧化石墨稀纳米银复合材料进行表征.结果表明纳米银呈球状均匀分布在氧化石墨烯表面.以大肠杆菌(MG1655)为模型菌,通过细菌生长动力学试验及荧光染色试验评价了氧化石墨烯纳米银复合材料的抑菌性能.结果表明,氧化石墨烯复合材料对大肠杆菌有较强的抑菌效果,且其卓越的抑菌效果是通过氧化石墨烯纳米银材料的协同作用来完成的.因此,氧化石墨烯纳米银是一种非常有效的抑菌材料.     

海洋微藻活体及乙醇固定状态下基因组DNA的微量提取方法

探讨了海洋微藻活体及固定状态下基因组DNA的提取方法,即作者改进的CTAB法.结果表明,CTAB改进法提取的基因组DNA蛋白质、酚、盐和小分子的污染较少,多糖成份也得到了有效去除.用5%乙醇固定样本提取DNA的效果最好,对原生动物抑制效果也较明显;10%以上的乙醇可杀死原生动物,但对DNA的降解率较大;30%以上的乙醇对细菌抑制较明显,但DNA都有较大程度的降解.本法提取的DNA可用于正常的酶切和PCR.用甲醛、甲醇/冰醋酸等其它固定液固定样品,DNA的得率低或者质量和纯度低.图7表1参27     

锰离子非均匀掺杂TiO2薄膜电极光电催化测定COD

COD是水体质量评价的一个重要指标,目前对于COD测定方法主要是高锰酸钾法和重铬酸钾法,这些方法的测定工艺相对繁杂.本文采用溶胶-凝胶法分步控制工艺制备锰离子非均匀掺杂二氧化钛的薄膜电极,并用该薄膜作为光电催化电极测定COD.在三电极体系中,比较该薄膜电极与纯二氧化钛薄膜电极对于氧化丁二酸、乙醇、邻苯二甲酸氢钾、α-D-葡萄糖四种有机物的影响.实验结果表明:三电极体系中电子转移的电量与有机物完全矿化所需的化学需氧量(COD)有着内在的关系.在相同的条件下,锰离子非均匀掺杂二氧化钛的薄膜氧化降解丁二酸、乙醇、邻苯二甲酸氢钾、α-D-葡萄糖的速率大于纯二氧化钛薄膜.进一步结合线性扫描伏安(LSV)、阻抗谱等光电化学表征,从锰离子非均匀掺杂引起二氧化钛薄膜光生空穴-电子分离,初步分析了其光电催化活性提高的机理.