簇毛麦(Dasypyrum villosum)GA20ox基因的分离和鉴定

通过RT-PCR技术克隆了簇毛麦(Dasypyrum villosum)赤霉素生物合成关键酶GA20ox基因的全长序列,命名为DvGA20ox,GenBank登录号为EU142949.该基因全长1 080 bp,推测编码359个氨基酸的蛋白质,具有植物GA20ox基因的典型保守结构域LPWKET和NYYPXCQKP.该基因推导编码蛋白质与小麦、大麦和黑麦草GA20ox蛋白的同源性分别为98%、97%和91%.该序列重组到原核表达载体pET-32a(+)获得的重组子pET-32a(+)-DvGA20ox转化大肠杆菌BL21pLysS后,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表明,DvGA20ox基因在大肠杆菌中获得了高效表达,融合蛋白相对分子质量为55×103h,与理论值相符.结果为深入研究DvGA20ox蛋白的结构与功能以及该基因与株高发育的关系奠定了基础.图3参19     

蚯蚓体内过氧化物还原蛋白PRDX基因对土壤PAHs污染胁迫的转录响应

在前期建立的苯并[a]芘(benzo[a]pyrene,BaP)诱导上调表达的蚯蚓cDNA文库中,发现一种过氧化物还原蛋白peroxiredoxin6(PRDX6)基因片段,并提交到GenBank.Blastx比对与基因进化分析结果表明,该序列与已知PRDX6的最高相似率为86%,期望值为4E-30.序列分析表明,该序列具有PRDX6基因含Cys编码的一个特征motif,表明该序列属于PRDX6基因.为进一步验证蚯蚓PRDX6基因对多环芳烃污染的响应情况,使用OECD推荐方法,进行了土壤菲、芘、荧蒽和苯并芘污染对蚯蚓的毒性响应的试验(周期28 d),并采用定量PCR方法,检测了各实验组蚯蚓PRDX6基因的表达差异.结果发现,1.0 mg·kg-1的芘和苯并[a]芘均可显著上调蚯蚓PRDX6基因的表达,表明PRDX6基因可作为土壤污染引起蚯蚓抗氧化应激检测的分子标记.     

重金属暴露铜锈环棱螺全组织均一化cDNA文库构建及表达序列标签特征分析

构建cDNA文库是寻找生物新功能基因的有效手段.采用SM ART技术构建了重金属铜和镉暴露铜锈环棱螺全组织均一化cDNA文库,文库库容为1.78×106克隆,重组率大于99%.从初始文库中随机挑取6000个克隆进行测序,获得5 473个高质量表达序列标签(ESTs)序列.经聚类分析得到3 961个Unigene(平均长...     

Enhancement of MK-7 synthesis by engineered strains of Bacillus subtilis natto that overexpress men genes and by increasing available dissolved oxygen北大核心CSCD

In recent years, researchers have discovered novel physiological functions of vitamin K2. In addition to promoting blood clotting, it can prevent osteoporosis and cardiovascular disease and is expected to treat some tumors and Parkinson’s disease. Bacillus subtilis natto is a probiotic that has been approved by the U.S. Food and Drug Administration for use as a bioproducer of vitamin K2. Its product’s main form is MK-7, which has a long half-life in the human body and high bioavailability. Bacillus subtilis natto displays great potential for large-scale biological preparation of vitamin K2. In this study, the Sipizizen method of Bacillus subtilis transformation was optimized to make it suitable for molecular transformation of Bacillus subtilis natto. Vectors for overexpression of all 8 genes involved in the menadione synthetic pathway were constructed, and changes in MK-7 fermentation yield after transformation of Bacillus subtilis natto were investigated. Three enzymes were found to exert significant effects on MK-7 synthesis, namely isopentenyltransferase (MenA), 1,4-dihydroxy-2-naphthoyl-CoA synthase (MenB), and nornaphthoquinone methyltransferase (MenG). A modified strain (BN-pABG) with higher MK-7 productivity was obtained by concerted overexpression of menA, menB, and menG. In a 5 L bioreactor, MK-7 synthesis was further enhanced by optimizing oxygen supply. The final yield of MK-7 from the modified strain was 62.21 mg/L, 1.26 times higher than that of the original strain. These results show that combined overexpression of menA, menB, and menG strongly promotes MK-7 synthesis by Bacillus subtilis natto, and optimizing the oxygen supply conditions also promotes more robust MK-7 synthesis. © 2022 Authors. All rights reserved.     

浅谈高中英语书面表达教学策略

书面表达在高考中占据举足轻重的作用,高中阶段书面表达写作能力提升目标是要切实过三关:卷面关、内容关和语言关。学生通过训练作文要达到卷面整洁,语意连贯,内容丰满,语言地道。教师要帮助学生达到这一目标,在教学中就一定要讲究教学策略。以下从五个方面进行阐述。     

报纸的视觉化表达方式与发展趋势

大数据时代,纸媒出现了盲目追逐"云时代""大数据时代""全媒体时代"而忽略自己一亩三分田的怪象。本文引入经济学"注意力经济"这一概念,从报纸的视觉化表达方式角度去挖掘报纸本身的注意力优势,注入企业识别系统(CIS),建立独特鲜明的报纸风格与形象,重塑报纸品牌。     

玉米内生固氮菌的回接分离及限菌条件下在玉米根内的定殖

对从玉米茎内分离的18株固氮菌进行了回接分离试验，经多碳源无氮培养基、菌落形态、颜色与REP－PCR相结合的方法，筛选、鉴定出了两株具有较高乙炔还原活性和能在玉米体内定殖的菌株R1和R6。把携带gfp标记基因的质粒pKK223-GFP和nifH-gfp的质粒pMGFP2.1分别转化R1和R6，得到携带gfp，且菌落带绿色荧光的转化子R1A和R6A，以及携带nifH-gfp的转化子R1B和R6B。在限菌条件下对R1A和R6A，在玉米根内的定殖以及R1B和R6B中nifH-gfp融合基因的表达进行了研究，结果表明了R1A和R6A主要定殖在根的皮层细胞、胞间隙、中柱细胞和导管内，有时在活的细胞内也可检测到，R1B和R6B中的融合基因因受玉米根内营养以及其它与固氮酶基因表达相关因素的限制，很难在玉米根内表达，只有在添加了1‰蔗糖后，nifH-gfp才能在根内表达。     

全球职业安全卫生战略：建立和保持国家预防性职业安全卫生文化

国际劳工组织的宗旨是为全人类寻求体面的劳动。体面的劳动是一种工作的原则和权利得到尊重的劳动,人们因此能够就业,在有保护的环境中工作并能表达个人愿望。体面的劳动也是安全的劳动,它对于生产力的提高和经济增长来说是一种积极因素。     

浅谈小学语文教学

教学实践证明,只有充分调动学生学习语文的兴趣,才能使学生参与其中,才能使学生成为语文教学的主体。因此,课堂不仅是学习知识的空间,更是学生生命活动的场所。课堂中会生成一些即发、非预想的教育性因素。教师对课堂中的生成性加以把持与整合,充分利用这些教学资源,让学生展示自已的风采,课堂不再是静止的跑道,而是提炼生活、体验人生、追求成功、感受欢愉、发展生命的过程。