产菊粉酶细菌菌株的筛选及菌种鉴定

从山东威海沿海滩涂菊芋生长的根际土壤中分离得到能产菊粉酶的菌株20株,经过进一步摇瓶复筛,获得了产菊粉酶活力较高的一株细菌F1,其发酵液酶活达到1.73U/mL。通过形态学观察、16SrDNA序列分析及生理生化研究,鉴定该菌为芽孢杆菌属的巨大芽孢杆菌(bacillus megaterium)。     

泡盛曲霉产菊粉酶的分离纯化和酶学性质

利用(NH4)2SO4分级沉降、透析袋、DEAE-纤维素离子交换层析、Sephadex凝胶层析和SDS-PAGE电泳分析对泡盛曲霉(Aspergillus awamori)分泌的菊粉酶粗酶液进行分离纯化,探究了菊粉酶的酶学性质,得到菊粉酶Ⅰ、菊粉酶Ⅱ、菊粉酶Ⅲ。菊粉酶的Ⅰ纯化倍数为10.81倍,酶比活力为261.13U/mg;菊粉酶Ⅱ的纯化倍数为14.19倍,酶比活力为400.72U/mg;菊粉酶Ⅲ的纯化倍数为13.92倍,酶比活力为392.99U/mg,表明泡盛曲霉产胞外菊粉酶具有三种同工酶成分。纯化的菊粉酶经SDS-PAGE检测,显示为单一条带。经测定该酶主要表现外切菊粉酶活力,最适温度为60℃,在20—60℃范围内具有良好的温度耐受性,最适p H为5.0,p H5.0—7.0之间具有较稳定的酸碱耐受性。以菊粉为底物,测得动力学常数Km=12.80mmol/m L、Vmax=31.87mg/(m L/min)。     

囊状青霉菊粉酶的分离纯化

利用盐析、分子筛和阴离子交换层析处理囊状青霉发酵液,得到菊粉酶Ⅰ、菊粉酶Ⅱ和菊粉酶Ⅲ。经纯化,菊粉酶Ⅰ纯化倍数达4.47倍,酶比活力179.15U/mg;菊粉酶Ⅱ纯化倍数达9.63倍,酶比活力385.45U/mg;菊粉酶Ⅲ纯化倍数达3.72倍,酶比活力149.10U/mg。纯化后的菊粉酶经SDS-PAGE检测,显示均为单一条带,相对分子质量确定为菊粉酶Ⅰ4.08×104、菊粉酶Ⅱ6.08×104、菊粉酶Ⅲ4.13×104,表明囊状青霉产胞外菊粉酶具有三种同工酶成分。     

真菌产漆酶对蒽醌类染料脱色的研究

以香菇发酵获得漆酶粗酶液,用该酶液对蒽醌类染料进行脱色研究,分别考察了反应温度、pH值、时峰、漆酶浓度和不同染料的脱色影响.结果表明,香菇产漆酶粗酶液对蒽醌类染料具有良好的脱色效果,脱色最佳条件为：温度在30℃左右、pH3-4、反应8h、酶单位在20-30U/L的脱色率达85％.     

交联木聚糖酶聚集体的制备及其性质研究

制备了交联木聚糖酶聚集体(CLEAs),并对其酶学性质进行了研究,以提高木聚糖酶的稳定性.通过毛栓菌发酵分离得木聚糖酶,经硫酸铵沉淀后以戊二醛作为交联剂对其进行化学交联,制得CLEAs,并用常规方法测定了各种因素对游离木聚糖酶和CLEAs的影响.在对耐热性、有机相中稳定性和耐酸碱性的研究中,CLEAs均表现比游离酶有较高的稳定性,因此运用CLEA技术可提高木聚糖酶的稳定性,使其广泛应用于饲料等工业生产中.     

壳聚糖对花生三种防御酶含量的影响

用不同浓度的壳聚糖溶液对花生种子进行包衣,然后测定在其萌发阶段种子内的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)等主要活性的变化.结果表明,壳聚糖处理花生种子可明显提高花生PAL、CAT的活性,对POD影响不显著.各种防御酶在5天内比空白对照组出现较明显的增加,说明外源壳聚糖提高了花生种子的防御酶活性,使花生得到更强的抗病性.     

毛木耳产漆酶发酵条件的研究

以毛木耳为产酶菌，以CMC为唯一碳源，探讨了不同培养条件对毛木耳产漆酶的影响。结果表明，在最适温度为27℃、pH值为6．0、接种量为10％、装液量为90mL／250mL、摇床转速为180rpm、培养天数为6d时，产酶活力最大。以各个因子的最佳梯度做优化培养，发酵液中的漆酶活力高达70．76IU／mL。     

紫贻贝消化腺淀粉酶的提取及部分性质研究

以紫贻贝为原料,从其消化腺中提取淀粉酶,确定其最佳提取条件,并探讨其部分酶学性质。采用缓冲液提取法,通过单因素试验考察提取温度、提取溶剂的pH和提取时间三个因素对紫贻贝消化腺中淀粉酶活性的影响。用平行对照试验来研究该酶的最适催化温度以及各种离子对其活性的影响。结果表明,该酶的最佳提取条件为温度20℃、pH值3.0-4.0、提取时间45min;最适反应温度为35℃,EDTA、Mg2+、Zn2+对该酶有抑制作用,而Ca2+、Mn2+对该酶有促进作用。     

产菊粉酶芽孢杆菌发酵条件优化

采用液体摇瓶培养方法,探讨了碳源、氮源、pH值、培养温度等各种因素对巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)分泌菊粉酶能力的影响.通过正交试验对主要影响因素进行优化,结果表明,最适产酶发酵条件为:菊粉30.0g/L、酵母膏7.0g/L、NaCl 5.0g/L、K2HPO4·3H2O 3.0g/L,初始pH 6.0,250mL发酵三角瓶装液量为50mL,30℃,160r/min振荡培养2d,酶活力达到最高,为2.354U/mL,比优化前提高了1.43倍.     

聚丙烯酰胺降解菌的分离和鉴定

三次采油产生的大量含聚丙烯酰胺(PAM)的污水急需处理,其核心问题是PAM的生物化学降解。文章叙述了从含聚合物油田污水中分离到七株PAM降解菌的过程,并对其营养物体系进行了初步研究及分子生物学鉴定。结果表明,分离到的七株菌可以以PAM为唯一氮源和碳源进行生长,但是生长速度较慢,添加液蜡或酵母膏等可导致微生物菌群的共代谢,能加快PAM的生物降解。七株菌分别归类于放线杆菌纲和α-变形菌纲及芽孢杆菌,与数据库中已知菌的同源性均超过98%。