黄孢原毛平革菌反复脱色模拟染料废水的试验研究

研究了白腐真菌黄孢原毛平革菌在35℃、150r／min条件下培养3d后，培养基类型、染料浓度以及反复脱色次数对其脱色的影响。玉米芯浸出液是首选的可替代营养源的物质，培养3d的黄孢原毛平革菌6h脱色率即达92％。黄孢原毛平革菌能够在短时间(6h)基本脱色较高浓度(40mg／L，60mg／L)的活性艳红K-2BP模拟染料废水，对于低浓度(10mg／L，20mg／L)脱色作用则比较缓慢，浓度超过150mg／L即显示出对菌的毒性作用。玉米芯浸出液培养3d的菌可以重复脱色模拟废水6次以上，每批脱色率均在82％以上，但菌球的沉降性能变差。     

黄孢原平革菌对碱性紫5BN的脱色降解研究

建立黄孢原毛平革菌与１０、５０、１００ｍｇ／Ｌ碱性紫５ＢＮ的共培养体系，研究菌种和培养条件对脱色降解效果的影响。方法采用分光光度法测定培养液最大吸收波长处吸光度的改变，确定染料的脱色率及降解率。     

黄孢原毛平革菌对碱性紫5BN的脱色降解研究

目的 建立黄孢原毛平革菌与10、50、100mg/L碱性紫5BN的共培养体系,研究菌种和培养条件对脱色降解效果的影响。方法 采用分光光度法测定培养液最大吸收波长处吸光度的改变,确定染料的脱色率及降解率。结果 (1)OGC101菌株的降解能力明显强于BKM-F-1767菌株,培养液最大吸收波长向短波方向移动,说明染料的N-去甲基化和降解中间物的形成;(2)琥珀酸钠缓冲液、04mM藜芦醇(VA)、浅层静置培养的参数组合较佳;(3)共培养30d后,各样品的脱色降解率为54％-98％;(4)染料浓度与脱色降解效应的相关性,因菌种而异。     

染料浓度和盐度对白腐真菌同工酶的电泳分析

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析,并比较了染料废水的两大因子(染料浓度和盐度)对黄孢原毛平革菌过氧化物同工酶谱带的影响程度,结果表明:在染料或盐胁迫下,黄孢原毛平革菌均表现出应急产酶的响应,虽然过氧化物同工酶谱带数量未发生增加或减少,但谱带强度受到较大影响,活性艳红X-3B浓度≤200mg/L或NaCl浓度≤15g/L时均能诱导过量产酶,继续提高染料浓度或盐度将导致产酶抑制,染料浓度对酶带的影响作用高于盐度。     

聚丙烯酰胺生物降解研究

研究了黄孢原毛平革菌对聚丙烯酰胺(PAM)的生物降解,从葡萄糖的加入量、pH、N浓度、Mn²⁺浓度和降解时间5个方面考察了对PAM降解的影响.结果表明,黄孢原毛平革菌对聚丙烯酰胺具有特殊的酶催化降解的能力,降解率可达50%,限氮条件(NH₄⁺=0.2g/L)和Mn2+浓度(Mn²⁺=0.017 5g/L)是菌株产聚丙烯酰胺降解酶的最佳条件.     

菌种品系及VA对黄孢原毛平革菌降解两种染料的影响

黄孢原毛平革菌的不同品系与染料亚甲基蓝的比布列希猩红的浅层静培养表明，对于亚甲基蓝而言，ME-446降解能力最强，OGC101和BKM-F-1767相似；以比布列希猩红为底物，则OGC101最好，ME-446其次，最后为BKM-F-1767。虽然外源藜芦醇（VA）的补充在培养初期有利于染料脱色降解率的提高；但一周后，与不添加VA的样品比较，脱色降解率接近或相等。这说明菌的品系存在降解能力的差异，完整菌体自身合成的VA足以维持降解培养体系的正常运作。     

接种白腐菌堆肥修复五氯酚污染的土壤

采用4组堆肥装置A、B、C、D,分别往五氯酚污染土壤中不加外来菌、加入固定化黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)、加入游离黄孢原毛平革菌及暴露在空气中不做任何处理.对其进行对比研究,探讨了利用堆肥的方法对五氯酚污染土壤进行生物修复的可行性.结果说明,添加黄孢原毛平革菌进行堆肥修复其效果要好于不加菌的效果,经过60d的堆肥,PCP基本得到降解,降解率都达到了94%以上,其中固定化菌又优于游离菌,固定化菌在第9d对PCP的降解率就达到了50%.此外,通过分析种子发芽率,有机质,微生物量碳等多项指标可以看出各组堆肥的腐熟情况都比较理想,为黄孢原毛平革菌降解五氯酚的过程提供了良好的外部环境,使土壤修复与堆肥能较好地结合起来.     

与黄孢原毛平革菌协同降解稻草的混合菌筛选

在纤维素筛选培养基中加入黄孢原毛平革菌稻草固态发酵的浸提液,用这种培养基从自然环境中筛选出与黄孢原毛平革菌相容的菌株,在PDA和MEA平板上进行相容性测试,选择出生长稳定,可以与黄孢原毛平革菌较好共存的6株真菌.考察了6株真菌分别与黄孢原毛平革菌混合培养降解稻草时的酶活和对木质纤维素类组分的降解,筛选出3组更优的组合,其混合培养时,对于纤维素酶能产生较好的协同效果,纤维素降解效果较好.对于木质素降解效率的显著提高,可能是由于发酵体系内的胞外酶和一些活性因子的作用.     

微量元素对黄孢原毛平革菌降解苯酚的影响

研究了氮源,铁、铜、锰等金属元素以及Tween 80等有机添加剂对黄孢原毛平革菌降解苯酚的影响。结果表明,氮源是黄孢原毛平革菌生长的必需元素,铜元素和锰元素对苯酚降解具有明显的促进作用,而铁元素的促进作用并不显著。各种微量元素的最佳浓度分别为:氮0.1 g/L、铁0.5 mmol/L、锰1.0 mmol/L、铜0.3 mmol/L、Tween 80 0.01 mmol/L。     

黄孢原毛平革菌对三苯甲烷染料的生物脱色降解

利用黄孢原毛平革菌对代表性三苯甲烷染料进行处理。菌的3种品系BKM-F-767．ME446和OGC101对10．50．100mg／L不同浓度的碱性紫5BN，碱性副品红、甲酚红．溴酚蓝和孔雀绿等5种染料具有不同程度的脱色降解能力。碱性副品红和溴酚蓝最为敏感．低浓度(10～30mg／L)孔雀绿的脱色降解效果最好．碱性紫5BN则一般．而甲酚红似乎抵御菌的进攻。紫外一可见光测定表明：碱性紫5BN在BKM-F-1767的作用下。培养液发生吸收峰朝短波方向的移动．标志着染料分子结构发生变化。     

黄孢原毛平革菌降解磷酸三苯酯的性能和机理

以白腐真菌的中的黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium）为实验菌种,考察不同环境条件因素对P.chrysosporium降解磷酸三苯酯（TPhP）的影响以及TPhP降解过程中菌体细胞特性的变化.结果表明,当孢子液的接种量为4%（V/V）,葡萄糖浓度为5g/L,pH值为5~6时,经过6d的处理P.chrysosporium对5mg/L TPhP的降解率可达到60%以上.菌体的细胞色素P450酶在TPhP的降解转化过程中发挥了重要的作用,抑制P450酶的活性会导致TPhP降解率下降.在降解反应的前期,为加快TPhP的代谢转化,菌体胞内蛋白含量以及ATP酶活性出现明显升高.在TPhP胁迫下,菌体SOD和CAT的活性随降解反应的进行呈现先升高后降低的趋势,2种抗氧化酶协同作用维持TPhP降解过程中菌体胞内的氧化还原平衡.     

黄孢原毛平革菌降解磷酸三苯酯的性能和机理

以白腐真菌的中的黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium）为实验菌种，考察不同环境条件因素对P.chrysosporium降解磷酸三苯酯（TPhP）的影响以及TPhP降解过程中菌体细胞特性的变化.结果表明，当孢子液的接种量为4%（V/V），葡萄糖浓度为5g/L，pH值为5~6时，经过6d的处理P.chrysosporium对5mg/L TPhP的降解率可达到60%以上.菌体的细胞色素P450酶在TPhP的降解转化过程中发挥了重要的作用，抑制P450酶的活性会导致TPhP降解率下降.在降解反应的前期，为加快TPhP的代谢转化，菌体胞内蛋白含量以及ATP酶活性出现明显升高.在TPhP胁迫下，菌体SOD和CAT的活性随降解反应的进行呈现先升高后降低的趋势，2种抗氧化酶协同作用维持TPhP降解过程中菌体胞内的氧化还原平衡.     

Comparison of decolorization of reactive microorganisms isolated from various sources

Azo dyes are among the oldest man-made chemicals and they are still widely used in the textile, printing and the food industries.About 10% - 15% of the total dyes used in the industry is released into the environment during the manufacturing and usage. Some dyes and some of their N-substituted aromatic bio-transformation products are toxic and/or carcinogenic and therefore these dyes are considered to beenvironmental pollutants and health hazards. These azo dyes are degraded by physico-chemical and biological methods. Of these, biological methods are considered to be the most economical and efficient. In this work, attempts were made to degrade these dyes aerobically. Theorganisms which were efficient in degrading the following azo dyes-Red RB, Remazol Red, Remazol Blue, Remazol Violet, Remazol Yellow,Golden Yellow, Remazol Orange, Remazol Black- were isolated from three different sources viz., wastewater treatment plant, paper milleffluent treatment plant and tannery was tewater treatment plant. The efficiency of azo dye degradation by mixed cultures from each source wasanalyzed. It was found that mixed cultures from tannery treatment plant worked efficiently in decolorizing Remazol Red, Remazol Orange,Remazol Blue and Remazol Violet, while mixed cultures from the paper mill effluent worked efficiently in decolorizing Red RB, Golden Yellow and Remazol Yellow. The mixed cultures from wastewater treatment plant efficiently decolorized Remazol Black.     

活性翠蓝生物降解性能的试验研究

通过试验比较了厌氧、好氧条件下活性污泥对活性翠蓝的生物降解机理、降解能力及受葡萄糖浓度影响的情况.结果表明厌氧菌不能单独降解活性翠蓝,只能通过共代谢作用降解活性翠蓝;而好氧菌既可以单独降解活性翠蓝(以活性翠蓝为唯一碳源时,20mg/L活性翠蓝的24h好氧降解率为37.4%),也可以通过共代谢作用降解活性翠蓝.葡萄糖浓度的升高对提高活性翠蓝的厌氧、好氧生物降解率均有利,当葡萄糖浓度为1200mg/L时,20mg/L活性翠蓝的24h厌氧、好氧降解率分别达到81.5%、73.6%.活性翠蓝浓度对厌氧菌、好氧菌的生物降解能力也有影响.当葡萄糖浓度分别为800mg/L、1200mg/L,活性翠蓝(浓度为20～100mg/L)的厌氧降解率比好氧降解率高4.9%～27.2%,说明厌氧菌对活性翠蓝的降解能力比好氧菌更强.     

黄曲霉A5p1对偶氮染料的降解特性和降解途径

以黄曲霉菌株A5p1为生物材料,研究其脱色染料的广谱性,并选择偶氮染料直接蓝71（DB71）为模型底物,探讨脱色特性及降解产物.该菌株对15种染料的脱色测试结果表明,染料浓度为100mg/L时脱色效率为61.7%~100%.该菌对偶氮染料DB71具有生物吸附和生物降解的双重作用,在pH值7.0,温度30℃,染料浓度300mg/L,蔗糖为碳源时对DB71 脱色率为100%.酶分析显示葡萄糖氧化酶和锰过氧化物酶参与染料的降解.FTIR、GC-MS和LC-MS分析确定代谢终产物为萘胺、叠氮萘、2-羟基-6-草酰-苯甲酸和1-萘酚.     

Effect of nitrogen concentration in culture mediums on growth and enzyme production of Phanerochaete chrysosporium

Effect of different nitrogen concentration in the mediums on growth and enzyme production of Phanerochaete chrysosporium was studied when glucose concentration was l0 g/L. The results showed that the medium contained 0.8 g/L ammonium tartrate is the best. It not only supply abundant nutrients for the growth of Phanerochaete chrysospodum, which make mycelia the best grow compared with the other medium, but also produce higher manganese-dependent peroxidase(Mnp) and laccase(Lac) activity. In addition, it is observed that the variation of mycelia surface is related to ligninolytic enzyme secreted by Phanerochaete chrysosporium. When the surface of mycelium pellets appeared burs, it predicts secondary metabolism begin. This experimentation demonstrated that when the ratio of carbon and nitrogen in nitrogen limited medium is equal to 100:8, growth and enzyme production of Phanerochaete chrysosporium is the best, it could achieve the maximum Mnp and Lac activity.     

真菌降解技术中载体固定和表面活性剂的作用

采用载体固定技术和加入表面活性剂的方法，以乙基橙和比布列希猩红为底物，建立黄孢原毛平霸菌－染料共培养体系。实验结果表明：聚乙烯泡沫小块和玻璃棉，可有效地固定菌体细胞，加速染料的脱色降解；在接种的同时加入０．１％～０．２％Ｔｗｅｅｎ８０，能有效地保护降解酶的性；培养方式、菌团大小、培养体系的生理特性等，和解体系的反应效率均有明显的影响。采用本方法能克服动培养系统对真菌反应体系的破坏，乙基橙和比布列希     

AFLP法分析染料对黄孢原毛平革菌的损伤效应

利用AFLP对DNA碱基序列分辨率高的特性,研究纯培养条件下染料对黄孢原毛平革菌(P. chrysosporium)菌株DNA的损伤效应.在对黄孢原毛平革菌(P. chrysosporium)AFLP最佳引物筛选的基础上,通过分析最佳引物扩增结果中DNA相似性、染料浓度与DNA相似性关系以及构建UPGMA相似性树状图,评价染料对P. chrysosporium DNA损伤效应.结果表明, AFLP法可较好反映染料对DNA损伤效应,在优选的3种引物组合中, E-AAC/M-CAA引物组合AFLP扩增效果最好,共获得35条DNA扩增条带,其中有12条具有特异性,多态性比率34.3%;在进行DNA相似性分析和UPGMA法聚类分析后发现, AFLP技术较好地表达了DNA相似性与染料浓度的正相关关系,并且显示P. chrysosporium对染料损伤效应敏感,染料浓度不宜高于50mg/L,当染料浓度达到300mg/L即可对P. chrysosporium产生较大损伤作用,使之基本丧失原有的处理功能.