一株中度嗜盐硫酸盐还原菌的分离及生理特性研究

本文从四川自贡盐厂卤水污泥中，分离出一株中度嗜盐硫酸盐还原菌。菌体为短杆状，０．９－１．１×２．０－２．５μｍ，革兰氏染色阴性，形成芽孢，不含脱硫孤菌素。固体培养基上无Ｆｅ２＋时，菌落为半透明状；有Ｆｅ２＋时菌落为黑色，直径为１－３ｍｍ。利用乳酸盐作为碳源，利用乙酸盐时必须添加生长因子。能在５％－２５％（Ｗ／Ｖ）Ｎａｃｌ浓度范围内生长，最适生长浓度为９％－１３％（Ｗ／Ｖ）。最适生长温度为３５℃。最适生长ｐＨ值为７．０．根据形态和生理生化特征，该菌为脱硫肠状菌属，但与该属已报导的硫酸盐还原菌在嗜盐、碳源利用、最适生长温度以及其它一些特征上均有不同，因此可能是个新种。该菌是目前已报道的嗜盐浓度最高的硫酸盐还原菌。     

流动注射荧光分析法用于土壤及水系沉积物中铈（Ⅲ）含量的测定

研究表明Ｃｅ＾３＋在ｐＨ〈６．２ＫＣｌ介质中以２５４．０ｎｍ紫外光激发时，在３５２．０ｎｍ处发出具有恒定强度的荧光。因而可选择ｐＨ５－６作为测定酸度条件，利用Ａｌ２（ＳＯ４）３消除Ｆｅ＾３＋等离子的干扰，建立起Ｃｅ＾３＋的流动注射荧光分析法。方法的线性范围是２．０×１０＾－７—２．０×１０＾－６ｍｏｌ／ｌ，一元回归方程△Ｆ＝６６３６００Ｃ－０．０４１（ｎ＝１０，ｒ＝０．９９９７），检测限６．０×１     

蔓茎堇菜细胞悬浮培养的研究

对蔓茎堇菜细胞悬浮培养的条件进行了选择，并测定悬浮培养的生长动态。结果表明：蔓茎堇菜细胞悬浮培养的最适接种量为２．０～３．５ｇ（５０ｍＬ）；最适培养基为ＭＳ＋２．０ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ＋１．０ｍｇ／Ｌ ＺＴ＋３００ｍｇ／Ｌ ＬＨ＋２００ｇ／Ｌ蔗糖（或葡萄糖），ｐＨ５．８；细胞悬浮培养一个周期过程中细胞数目增长的动态基本上是一条Ｓ型曲线，对数生长期明显；细胞鲜重（ｍＦＷ）和细胞干重（ｍＤＷ）则与细胞     

转化血型用蕃茄α－D－半乳糖苷酶的分离、纯化及理化性质

成熟蕃茄匀浆后，经硫酸铵盐析，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０离子交换层析，ＳｅｐａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ－Ａｇａｒｏｓｅ亲和层析，获得了α－Ｄ－半乳糖苷酶（Ｃ．Ｅ．３．２．１．１１）。酶制剂经ＰＡＧＥ检测为一条带；ＳＤＳ－Ｇ－ＰＡＧＥ测得酶Ｍｒ为３４０００；比活力５２．９Ｕ／ｍｇ·；提纯倍数为５２９０１产率为４５％．酶专－催化以α－Ｄ－半乳糖为末端ａ－（１，３）连接的糖苷键，以ＰＮＰＧ（对硝基苯－α－Ｄ－半乳糖昔）为废物，酶催化反应的Ｋｍ＝０．１１ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｖｍａｘ为６７μｍｏｌ·ｍｇ１－·ｍｉｎ－１．ｔ稳定范是０～３５℃；ＰＨ稳定范围是４．０～７．０．最适ｐＨ为５．１．半乳糖是酶的竞争性抑制剂；Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｆｅ３＋、Ａｇ＋和ＥＤＴＡ对酶活性无影响．纯酶制剂可作为Ｂ型血向Ｏ型血转化的工具酶液．     

大气微生物粒子与飘尘粒子的关系

用ＡＮＤＥＲＳＥＮ生物粒子采样器和光散射气溶胶粒子计数器，在北京西单对大气细菌、真菌和飘尘粒子的浓度、粒度分布及它们之间的关系进行了观测和研究。结果表明，大气细菌的粒度是负偏态分布，大气真菌是对数正态分布，飘尘是正偏态分布。大气细菌浓度与飘尘浓度的比值冬季大，为１１９５３８；夏季小，为２４２１７；年平均比值为６７５１７，＞２．０μｍ的菌尘比值为１５２５３８７，２．０μｍ～８．２μｍ的菌尘比值为３３１８，＞８．２μｍ的菌尘比值为３９４。大气真菌浓度与飘尘浓度的比值冬季大，为２１２７７０；夏季小，为６５５８５；年平均比值为１３５３４４，＜２．０μｍ的菌尘比值为９５２６９８，２．０μｍ～８．２μｍ的菌尘比值为５３４３，＞８．２μｍ的菌尘比值为２６３２。     

硅营养缓解水稻幼苗Cd、Cr毒害的生理研究

两系法杂交稻“培杂山青”和常规稻“双桂３６”幼苗经较高浓度的Ｃｄ２＋（ｃ＝９．６～３８．４μｍｏｌ／Ｌ）或Ｃｒ３＋（ｃ＝７．５～２５．０μｍｏｌ／Ｌ）处理可使其叶片光合速率、叶绿素（ａ＋ｂ）含量、叶绿素ａ／ｂ比值、叶片可溶性糖、淀粉及可溶性蛋白质含量降低，而叶片的ＰＯＤ活性提高；低浓度Ｃｄ２＋（ｃ＝４．８μｍｏｌ／Ｌ）和Ｃｒ３＋（ｃ＝２．５μｍｏｌ／Ｌ）处理幼苗对上述生理指标有提高作用，但ＰＯＤ活性稍降低．加Ｓｉ（Ｎａ２ＳｉＯ３）［ｃ（ＳｉＯ２）＝１．３３１ｍｍｏｌ／Ｌ］的Ｃｄ、Ｃｒ处理比不加Ｓｉ的Ｃｄ、Ｃｒ处理的幼苗叶片上述生理指标明显提高，且明显降低其ＰＯＤ活性．说明Ｓｉ在不同程度上起到缓解Ｃｄ、Ｃｒ对水稻幼苗的毒害作用．而ｃ（Ｃｒ３＋）＝２５．０μｍｏｌ／Ｌ是“双桂３６”幼苗的致死浓度     

青霉菌BS—1还原Cr^6＋的条件及影响因子

青霉菌ＢＳ－１生长时还原Ｃｒ＾６＋的条件下：最适碳源为蔗糖或糊精，最适氮源是硫酸铵，最适温度３０℃，最适ＰＨ７．０，加入一定浓度的酵母浸出物可促进该菌对Ｃｒ＾＋的还原。不同预培养条件对该菌还原Ｃｒ＾６＋无明显影响，由此认为该菌对Ｃｒ＾６＋的还原是非诱导性的Ｈｇ＾２＋，Ｃｕ＾２＋，Ｃｏ＾２＋和Ｎｉ＾２＋对ＢＳ－１生长及Ｃｒ＾２｜还在有明显抑制作用，但在ρ（Ｎａ２ＳｅＯ４）＝１００ｍｇ／Ｌ时，则对该菌     

湖南主要农田土壤中氮的形态

本试验采集了湖南省八种主要母质发育的２３个农田土壤耕层样本，其中水田土壤１６个，旱地土壤７个．将土壤氮分为七级．即交换性ＮＨ４＋十ＮＯ３－，水解性ＮＨ４＋，氨基糖氮，可溶性碱稳定态氮，酸溶性腐殖质态氮，固定态ＮＨ４＋，难溶性腐殖质态氮。分析结果表明，土壤中交换性ＮＨ４＋十ＮＯ３－的含量为２２．０土９．０ｍｇ／ｋｇ，占全氮的１．７土０．７％；水解性ＮＨ４＋为３２４．４土１０９．５ｍｇ／ｋｇ，占全氮的２３．９±５．６％；氨基糖氮为１１８．９土４３．０ｍｇ／ｋｇ，占全氮的９．１土３．２％；可溶性碱稳定态氮为４９７．１土２０５．８ｍｇ／ｋｇ，占全氮的３６．２土８．３％；酸溶性腐殖质态氮为２９．２土１０．２ｍｇ／ｋｇ，占全氮的１３土０．８％；固定态ＮＨ４＋为４７．２土２４．３ｍｇ／ｋｇ，占全氮的３．６±１．７％；难溶性腐殖质态氮为３４１．３土２７０．８ｍｇ／ｋｇ，占全氮的２２．２土１１．６％。     

饮用水低温生物预处理生化活性研究

为了给饮用水低温生物预处理技术的应用与开发提供实验依据，利用陶粒柱连续流生物反应器，于低温（水温２─５℃）季节，对某水源水进行预处理的同时，研究和探讨了陶粒柱生物反应器的生化活性。结果表明，试验装置在低温季节对原水的净化效果较好；陶粒柱反应器内ＴＴＣ－脱氢酶活性沿水流方向自上而下呈梯度分布；低温条件下测定的反应器上、中、下层生物陶粒ＴＴＣ－脱氢酶活性分别为２２．３９、５．７０、０．４０８μｇＴＦ／ｃｍ３·ｈ－１；生物陶粒ＴＴＣ－脱氢酶活性与活性细菌数的时数（ｌｏｇＡＢＮ）之间具有显著相关性（ｒ＝０．８４９３．ｎ＝２５）。因此，可以认为，ＴＴＣ－脱氢酶活性是研究和描述饮用水生物预处理效果的有效参数。     

不同菌源的微生物对邻苯二甲酸二甲酯生物降解性的比较

从处理石化厂废水的活性污泥中分离出１ 株邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１（ 荧光假单胞菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ Ｆ Ｓ１） ,从处理焦化厂废水的活性污泥中分离出２ 株邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ２（ 铜绿假单胞菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎａｓａ Ｆ Ｓ２） 和 Ｆ Ｓ３（ 短杆菌 Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ ． Ｆ Ｓ３） ． 研究了邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１ , Ｆ Ｓ２ 和 Ｆ Ｓ３ 对邻苯二甲酸二甲酯（ Ｄ Ｍ Ｐ） 的最适降解条件,比较了其降解特性． Ｆ Ｓ１ 、 Ｆ Ｓ２ 和 Ｆ Ｓ３ 最适酸度分别为ｐ Ｈ６ ．５ ～８ ．０ 、ｐ Ｈ７ ．０ ～８ ．０ 和ｐ Ｈ７ ．０ ～８ ．０ ,温度为２０ ～３５ ℃、１５ ～３５ ℃和１５ ～３５ ℃．邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１ 、 Ｆ Ｓ２ 和 Ｆ Ｓ３ 对邻苯二甲酸二甲酯的降解的半寿期： Ｆ Ｓ１ ＜ Ｆ Ｓ２ ＜ Ｆ Ｓ３ ,邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１ 是一株高效的邻苯二甲酸二甲酯降解菌     

固定CO2氢细菌的筛选及其培养条件优化

从土壤中分离筛选到一株高效固定CO2 的氢氧化细菌—专性化能自养菌BHA 15 ,在最佳培养条件下(培养基 ρ/gL-1:NH4 Cl 4.0 ,Na2 HPO4 ·12H2 O 0 .75 ,KH2 PO4 0 .5 ,MgSO4 ·7H2 O 0 .3;V(H2 )∶V(O2 )∶V(CO2 ) =3 .5∶1∶1;pH =7;最适生长温度θ =30℃ ) ,密闭摇瓶中恒温 (30℃ )培养 40h后 ,菌体浓度 ρ(DW)达 1.6mg/mL ,菌体蛋白含量 71.8% .图 7表 2参 12     

中度嗜盐菌Halomonas sp.BYS-1启动子的克隆和测序

提取了中度嗜盐菌Halomonassp.BYS1的基因组DNA,以甲基对硫磷水解酶基因(mpd)为报告基因,以启动子探针pUCmpd为载体,通过鸟枪法在E.coliDH5α中构建了BYS1的启动子文库.通过筛选获得了17个阳性克隆,编号为P1～P17.测定了阳性克隆的甲基对硫磷水解酶(MPH)活性,结果表明,P3中mpd基因的启动子活性最强,它的酶活高达2554.3U/mg,而P17中mpd基因的启动子活性最弱,它的酶活只有68.3U/mg.对P3、P8、P17克隆中的重组质粒的插入片段进行了测序和在线启动子预测.图4表1参17     

一株焦化废水降酚菌的质粒初步研究

从处理焦化废水的活性污泥池中,分离得到了一株具有降酚能力的细菌, Ｊ Ａ． Ｊ Ａ 可以在含酚的 Ｈ Ｐ 复杂培养基中生长,也可以在以酚为唯一碳源的 Ａ Ｂ Ｐ 培养基中生长,且具有产黑色素的特点．用碱裂解提取质粒的方法发现它含有一个质粒,定名为ｐ Ｘ Ｈ１ ,并测定了这个质粒的大小约为２ ．６ ｋｂ ．用限制性内切酶 Ｂｇｌ Ｉ和 Ｒｓａ Ｉ进行双酶切,作出了初步的物理图谱．ｐ Ｘ Ｈ１ 经过２０ 次没有酚作为选择压传代培养后仍然能１００ ％ 保留,同时, Ｊ Ａ菌仍具有降酚能力,表明其具有很高的遗传稳定性     

近海养虾场底泥中产芽孢细菌的生态特征

通过对近海养虾场底泥中的细菌数量和类群的调查，发现有超过50％的细菌生物量是产芽孢细菌，因此对底泥中的产芽孢细菌进行了分离和纯化，通过对细胞形态、生理生化等特征的研究和对部分菌株的16S rRNA基因的ARDRA分型、序列分析等，鉴定了67株产芽孢细菌，其中62株属于芽孢杆菌属，5株属于短芽孢杆菌属．进一步对62株芽孢杆菌属的细菌在底泥不同深度的分布进行研究，结果表明，巨大芽孢杆菌主要分布在底泥深度0～6cm左右的区域，海洋芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌主要分布于底泥6cm以下的区域，与坚强芽孢杆菌性状相近的菌分布在底泥2～8cm深度；与耐碱芽孢杆菌性状相近的芽孢菌广泛分布在0～12cm区域．讨论认为，应用这些产芽孢细菌资源在修复海洋环境和开发海水养殖微生态制剂方面具有一定可能性．图3表3参15     

3株油脂化工废水降解菌的分离鉴定

本研究从油脂化工废水处理装置中分离到３ 株降解脂肪酸和脂肪胺的功能菌,所筛选菌株对油脂化工生产废水有较好降解能力,其中 Ｆ Ａ２ 菌株对 Ｃ１８ 烯酸和 Ｃ１８ 伯胺作用４８ ｈ 的降解率分别为８８ ．８ ％ 和８２ ．３ ％ ．３株细菌分别归类于葡萄球菌属（ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ） 和棒状菌群     

碱性β-聚糖酶产生菌选育及产酶条件优化

从碱性土样中分离到数十株产碱性β聚糖酶类的细菌,经摇瓶反复筛选后,得到一株碱性β聚糖酶产量较高的耐碱性细菌．经初步鉴定,属短小芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｐｕｍｉｌｕｓ）．其纤维素酶作用的最适ｐＨ为７．６,最适θ为６０℃,木聚糖酶的作用最适ｐＨ为９．０,最适θ为５５℃．该菌的最适生长ｐＨ为８．０,最适产酶θ为２８～３２℃．木聚糖与山梨糖分别是木聚糖酶和纤维素酶的良好诱导物．以麸皮为碳源,产酶的最适浓度为５％．添加尿素和（ＮＨ４）２ＳＯ４为氮源可提高纤维素酶酶活２倍,木聚糖酶酶活１倍．发酵周期为６０ｈ,纤维素酶酶活最高可达１．２１ＩＵｍＬ－１,木聚糖酶酶活可达４３ＩＵｍＬ－１．     

海水养虾池细菌数量动态及细菌生产力的研究

对5个海水养虾池细菌数量动态及细菌生产力的研究结果表明：水层细菌数在不同试验池及同一池塘不同采样时间均呈现较大波动．细菌密度在底水层明显高于表水层，且同一虾池细菌密度在水平分布上极具不均匀性．底泥中细菌数在采样期稳定增加并与底泥中有机物含量呈现显著正相关,随着泥层加厚，细菌密度呈V型分布，最大密度出现在表层1cm之内，2cm以下泥层，细菌密度明显减小原位（in－situ）实验测定所得虾池细菌生产力ρ4（C）·t－1＝86．10～343．25mg·m－2·d－1，是浮游植物初级生产力的10％～19％     

甲基对硫磷降解菌GFP标记菌株的构建

用Sau3AⅠ酶切甲基对硫磷降解菌DLL 1总DNA ,与BamHⅠ酶切的启动子探针载体 pRobe -GFP酶连 ,转化E .coliDH5α ,在选择性平板LB(Ampr)上从大约 1× 10 4个菌落筛选到 5 0个含启动子片断的阳性克隆 .挑选其中一个阳性克隆 ,将启动子片断克隆到pIJ2 92 5和 pBBR -MCS2上构建成重组质粒 pIJGFP和广宿主标记载体pB BRGFP .然后将 pIJGFP载体上的启动子片断克隆到广宿主载体 pTR10 2上 ,获得第二个广宿主标记载体pTRGFP .将pTRGFP和pBBRGFP通过三亲接合分别标记于DLL 1得到两株标记菌 ,即DLLTR和DLLBR .通过激光共聚焦显微镜观察和软件Lasersharpversion 3.2分析发现 pTRGFP在E .coli中表达很强而在DLL 1中表达很弱 ,而 pBBRGFP正好相反 .图 5表 2参 12     

微生物法在油气勘探中的应用研究

石油天然气的微生物勘探法是通过测定土壤中以微渗漏轻烃为食物来源的微生物菌落来圈定烃类渗漏的范围.本文探讨了甲烷氧化菌、厌氧纤维素分解菌和硫酸盐还原菌在油气勘探中的意义,并将其作为指示微生物,以川西孝泉地区已知天然气田为例,对微生物油气勘查技术的试验效果进行研究.结果发现,在气田上方指示微生物存在明显异常现象,即在气田上方甲烷氧化菌、厌氧纤维素分解菌数量较少,硫酸菌还原菌较高;气田外缘甲烷氧化菌、厌氧纤维素分解菌数量较高,而硫酸菌还原菌较低.研究表明,微生物地表油气勘探技术用于油气预测是有效的.图2参12     

一株降解除草剂膦化麦黄桐(PPT)菌的筛选与鉴定

从喷洒有除草剂的土壤中分离到一株能分解膦化麦黄桐(PPT)的细菌.该菌在以PPT为唯一碳源的培养基上生长,能利用PPT的最高浓度为2. 7g/L.采用常规生理生化鉴定方法,并结合16SrDNA序列分析法对该菌进行鉴定.结果表明,该菌与生癌肠杆菌(Enterobactercancerogenus)序列相似性为99. 3%,在细菌分类学上属于肠杆菌.将它命名为Enterobactersp. PPT. 图4表2参7