链霉菌碱性脂肪酶的研究

从杭州土壤中获得的一支链霉菌,通过ＵＶ、ＤＥＳ和Ｃｏ６０ － γ射线的５ 代诱变,选育成功了高产的Ｚ９４－ ２ 菌株,经过对Ｚ９４ －２ 的发酵研究,产碱性脂肪酶活力达５９６ ｕｍＬ,其最适培养基（λｕ Ｌ－１） 为：糊精１０、黄豆饼粉３０、尿素１０ 、Ｋ２ＨＰＯ４０ ．５、ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０ ．５、ＮａＣｌ１ 和ＡＥＯ９ ０．５ ,产酶的最适条件为：初始ｐＨ９．０～１０．０ ,２６℃培养４８ ｈ．对Ｚ９４－ ２ 与其他菌株的碱性脂肪酶的特性作了比较     

碱性β-聚糖酶产生菌选育及产酶条件优化

从碱性土样中分离到数十株产碱性β聚糖酶类的细菌,经摇瓶反复筛选后,得到一株碱性β聚糖酶产量较高的耐碱性细菌．经初步鉴定,属短小芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｐｕｍｉｌｕｓ）．其纤维素酶作用的最适ｐＨ为７．６,最适θ为６０℃,木聚糖酶的作用最适ｐＨ为９．０,最适θ为５５℃．该菌的最适生长ｐＨ为８．０,最适产酶θ为２８～３２℃．木聚糖与山梨糖分别是木聚糖酶和纤维素酶的良好诱导物．以麸皮为碳源,产酶的最适浓度为５％．添加尿素和（ＮＨ４）２ＳＯ４为氮源可提高纤维素酶酶活２倍,木聚糖酶酶活１倍．发酵周期为６０ｈ,纤维素酶酶活最高可达１．２１ＩＵｍＬ－１,木聚糖酶酶活可达４３ＩＵｍＬ－１．     

碱性β—聚糖酶产生菌选育及产酶条件优化

从碱性土样中分离到数十株产碱性β－聚糖酶类的细菌经摇瓶反复筛选后,得到一株碱性β－聚产产量较高的耐碱细菌经初步鉴定,属短小芽孢杆菌,其纤维素酶作用的最适ＰＨ为７．６,最适θ为６０℃,木聚糖酶的作用最适ＰＨＪ为９．０,最适θ为５５℃,该菌的最适生长ＰＨ为８．０,最适产酶θ为２８－３２℃,木聚糖与山梨糖分别是木聚糖酶和纤维素酶的良好诱导物,以麸皮为碳源,产酶的最适浓度为５％,添加尿素和（ＮＨ４）２ＳＯ     

嗜碱菌A4—10碱性纤维素酶产生及性质的初步研究

从４８份土壤和天然碱湖榈分离出能产生胞外碱性纤维素酶的嗜碱细菌１３５株,其中７株菌产酶活力大于３Ｕ／ｍＬ,菌株Ａ４－１０经条件试验后酶活力达２１Ｕ／ｍＬ,该菌产生碱性纤维素酶最适培养温度为３４℃,最适碳源为ＣＭＣ－Ｎａ,最适氮源为复合蛋白胨和酵母粉,该酶的最适反应温度５５℃,最适反应ｐＨ９．０。     

嗜碱菌A4-10碱性纤维素酶产生条件及性质的初步研究

从４８ 份土壤和天然碱湖样品分离出能产生胞外碱性纤维素酶的嗜碱细菌１３５ 株,其中７ 株菌产酶活力大于３ Ｕ／ｍＬ,菌株Ａ４１０ 经条件试验后酶活力达２１ Ｕ／ｍＬ,该菌产生碱性纤维素酶最适培养温度为３４ ℃,最适碳源为ＣＭＣＮａ,最适氮源为复合蛋白胨和酵母粉,该酶的最适反应温度５５ ℃,最适反应ｐＨ９．０ ．     

螺孢菌ZG9901的筛选及其产碱性果胶酶发酵条件研究

用筛选培养基从芦苇土壤中筛选到７株碱性果胶酶产生菌株，经初筛选和复筛得到产酶活性较高的一株菌株ＺＧ９９０１，初步鉴定为螺孢菌属Ｓｐｉｒｉｌｌｏｓｐｏｒａ ｓｐｐ．最适摇瓶产酶条件是：果胶２０ｇ／Ｌ，乳糖２０ｇ／Ｌ，蛋白胨３ｇ／Ｌ，酵母膏４ｇ／Ｌ，ＫＨ２ＰＯ４１ｇ／Ｌ，ＭｇＳＯ４．７Ｈ２Ｏ０．０４ｇ／Ｌ，ＭｇＣｌ２０．２ｇ／Ｌ，ｐＨ９．０，３２℃培养３６ｈ达到产酶高峰。     

脱色酶和优势菌混合固定化降解染料的研究

本文对分离到的脱色优势菌ＤＮ１的脱色酶特性进行了研究,将脱色酶与苯胺降解菌混合固定化处理染料废水,结果表明,脱色酶在厌氧条件下对染料的脱色效果好,最适条件为３７℃,ｐＨ７．０;固定化酶相比粗酶液有更高的活性,对温度、ｐＨ、氧的要求范围较宽;混合固定化降解染料,脱色率及苯胺降解率分别大于８０％和９０％。     

转化血型用蕃茄α－D－半乳糖苷酶的分离、纯化及理化性质

成熟蕃茄匀浆后，经硫酸铵盐析，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０离子交换层析，ＳｅｐａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ－Ａｇａｒｏｓｅ亲和层析，获得了α－Ｄ－半乳糖苷酶（Ｃ．Ｅ．３．２．１．１１）。酶制剂经ＰＡＧＥ检测为一条带；ＳＤＳ－Ｇ－ＰＡＧＥ测得酶Ｍｒ为３４０００；比活力５２．９Ｕ／ｍｇ·；提纯倍数为５２９０１产率为４５％．酶专－催化以α－Ｄ－半乳糖为末端ａ－（１，３）连接的糖苷键，以ＰＮＰＧ（对硝基苯－α－Ｄ－半乳糖昔）为废物，酶催化反应的Ｋｍ＝０．１１ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｖｍａｘ为６７μｍｏｌ·ｍｇ１－·ｍｉｎ－１．ｔ稳定范是０～３５℃；ＰＨ稳定范围是４．０～７．０．最适ｐＨ为５．１．半乳糖是酶的竞争性抑制剂；Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｆｅ３＋、Ａｇ＋和ＥＤＴＡ对酶活性无影响．纯酶制剂可作为Ｂ型血向Ｏ型血转化的工具酶液．     

吡虫啉的光解水解和土壤降

在实验室测定了吡虫啉的光解、不同ｐＨ条件下的水解与在东北黑土等３种不同土壤中的降解。试验结果表明，在３００Ｗ低压汞灯下，吡虫啉水相溶液的光解呈一级反应动力学反应，光解半衰期为６．８１ｈ；在ｐＨ５、ｐＨ７、ｐＨ９的缓冲溶液中的水解半衰期分别为３０．６、１３．６与８．０ｄ；在东北黑土、太湖水稻土和江西红壤中的降解半衰期分别为１０．７、１１．１和４．１ｄ。     

皮革废物铬革屑的微生物学处理研究Ⅱ:降解革屑微生物的发酵条件及其蛋白酶的降解研究

在以皮胶原为碳、氮源时其最适产酶条件为ｐ Ｈ７ ,３０ ℃,高产酶时间为４ ｄ ．经 Ｃａ（ Ｏ Ｈ）２ 预处理革屑不能有效促进该菌对革屑的降解,但可使大部分 Ｃｒ３ ＋ 沉淀而除去．经该株蛋白酶的粗提及性质实验,确定酶的最适反应条件为４０ Ｃ、ｐ Ｈ７ ．０ ～８ ．０ , Ｃｒ３ ＋ 对酶有轻度的抑制作用,以２ ．２６ ％ 的粗酶作用于革屑,水解率达５０ ％ 以上     

酸雨,降尘对莴苣和小白菜3种抗氧化酶活性的影响

用酸雨（A）、降尘（D）、酸雨和降尘（A＋D）处理生长在紫色中性土和紫色酸性土上的莴苣和小白菜，以研究3种处理对2种蔬菜中超氧物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）活性的影响．结果表明：3种处理可提高莴苣中的SOD和CAT的活性，且以（A＋D）处理最为明显．与CK相比，在酸性土中，（A＋D）处理可使SOD活性提高11．1％～21．2％，CAT活性提高15．5％～22．7％；3种处理可使小白菜POD活性提高，其中中性土（A＋D）处理可使POD活性比CK提高50％～52％．     

农药降解酶的固定化及其降解特性

采用海藻酸钙凝胶将 Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｓｐ ． Ｙ Ｆ１１ 农药降解酶进行固定化,并测定了固定化酶对杀灭菊酯的降解特性． 农药降解酶的固定化条件为：海藻酸钠质量浓度,３０ ｇ／ Ｌ;蛋白质量浓度,０ ．２ ｇ／ Ｌ;固定化时间ｔ ＝ １６ｈ ;粒径４ ｍｍ ． 固定化酶降解杀灭菊酯的最适ｐ Ｈ 为８ ．０ 、最适温度为３５ ℃, Ｋｍ５５ ．０ μｍｏｌ／ Ｌ     

多位点酶电泳在黄芪根瘤菌分类中的应用

报导了分析根瘤菌各种多位点酶的电泳缓冲系统和染色方法，并对黄芪根瘤菌进行了分类研究，结果表明：采用多位点酶电泳图谱进行聚类可得到与数值分类基本一致的结果，证实这是一种行之有效、简便快速的分类方法．     

极端嗜热厌氧纤维素菌的分离鉴定、系统发育分析及其酶学性质的研究

从云南高温温泉、油井等热源地区采集的大量样品中,获得了一株特殊的极端嗜热厌氧纤维素分解菌B2.分离菌株直杆,革兰氏阴性(G-),未观察到孢子,细胞单个或成对出现.菌体大小为0.4μm×(2-4)μm,严格厌氧,生长温度范围50-70℃,最适生长温度65℃.pH范围4-8,最适pH 7.0.在纤维素粉琼脂上菌落直径2-4 mm,乳白色.分离菌株能利用纤维二糖、葡萄糖、蔗糖、松子糖、淀粉、覃糖等作为碳源,分离菌株还可利用纤维素滤纸、纤维素粉、微晶纤维素、纤维素粉MN300和甘蔗渣、水稻秸杆.发酵纤维素产生乙醇、乙酸.在菌株B2的纤维素酶系中,C1酶、Cx酶和β-葡萄糖苷酶的最适温度分别为80℃、80℃和70℃,其比值为1:9:10,同时发现Cx酶具有较高的热稳定性.部分长度的16S rDNA序列分析表明,分离菌株B2与Thermoanaerobacter ethanalicus具有99.8％相似性.分离菌株B2为Thermoanaerobacter属.图5表3参21     

川西亚高山冷杉林和白桦林土壤酶活性季节动态

研究了川西亚高山冷杉林和白桦林中与土壤碳氮元素循环有关的土壤脲酶、蛋白酶、转化酶、过氧化氢酶、多酚氧化酶和脱氢酶活性的季节变化规律．结果表明：(1)在两个群落中，腐殖质层(A)中6种土壤酶活性均高于淀积层(B)和母质层(C)中的酶活性；(2)白桦林A层土壤酶活性显著高于冷杉林A层土壤，而C层的脲酶和过氧化氢酶活性以冷杉林明显高于白桦林，但C层的其它4种酶活性没有明显差异；(3)土壤酶活性的高峰期主要出现在温度较高的7、8月份(冷杉林A层土壤中的蛋白酶、过氧化氢酶和脱氢酶，白桦林A层土壤中的蛋白酶、蔗糖酶和脱氢酶)，或是凋落物高峰期的10月份(冷杉林A层土壤中的脲酶、多酚氧化酶和蔗糖酶，白桦林A层土壤中的多酚氧化酶)．可见，不同土壤酶的活性对温度的敏感程度是不一样的，有一些土壤酶的活性(如多酚氧化酶)明显受凋落物动态的影响．图1表2参18     

酸性红壤施石灰对甘蔗养分状况某些酶活性及生长的影响

研究结果表明．酸性红壤施适量石灰，能改善甘蔗的Ｎ、Ｐ、Ｋ养分状况，提高Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和中性转化酶活性，减缓甘蔗在伸长期Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性降低的幅度，极显著地促进甘蔗生长。石灰施用量与甘蔗叶片Ｎ、Ｋ含量、Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性及甘蔗株高里极显著或显著的二次函数曲线相关；与甘蔗叶片含Ｐ量、中性转化酶活性亦呈二次函数曲线相关，但相关性未达显著水平。研究结果还表明，施石灰量不同对甘蔗各生长时期株高的影响很大，施用量为１．２ｔ／ｈｍ２左右时，甘蔗前、中、后期的株高都极显著的高于对照，小于０．４ｔ／ｈｍ２或大于２．０ｔ／ｈｍ２时，甘蔗生长后期的株高与对照差异不显著．     

水分胁迫对燥红土和变性土上生长的玉米叶片几种酶活性的影响

采用盆栽控制试验，研究了不同处理条件下，水分胁迫对金沙江干热河谷典型土壤(燥红土和变性土)生长的玉米(Zea mays L.)叶片中几种酶活性的影响．结果表明：(1)在一定的水分胁迫范围内，玉米叶片的过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(ASP)和多酚氧化酶(PPO)活性均随着土壤含水量的降低而升高，但过度胁迫时，酶活性降低；(2)随着土壤含水量降低，玉米叶片中保护酶活性的变化规律略有差异，这与二者的土壤物理性质有关；(3)施肥处理和栽培方式对玉米叶片的酶活性有影响，增施有机肥和Zn肥可提高适度水分亏缺条件下玉米叶片中POD、CAT、ASP和PPO活性．图4参35     

塔马亚历山大藻与细菌的共培养及其微生态效应

为研究赤潮藻类与海洋细菌的微生态关系，在实验室模拟条件下将塔马亚历山大藻（Alexandrium tamarense(Lebour)Balech)与海底沉积物中分离的两种细菌（Bacillus megaterium,S7;B.halmatpulus,S10)共同培养，并探讨了藻菌共培养对A.tamarense生长以及对水体中胞外酶β－葡萄糖苷酶活性（β－GlcA)的影响。实验结果表明，在培养的第2周内，与细菌S7或S10共培养的A.tamarense细胞数分别比CK增加约12％和24％，而在第3周内则各增加23％和5％左右。另外，分别与A.tamarense共培养的细菌S7或S10的β－GlcA变化趋势相似，呈马鞍型曲线。在A.tamarense生长的后期，β－GlcA随着藻细胞的裂解程度的增加而迅速提高。图3参25     

解淀粉芽孢杆菌DC-4豆豉溶栓酶成熟肽编码序列的克隆及表达

利用PCR方法从解淀粉芽孢杆菌DC 4总DNA中扩增出豆豉溶栓酶 (DFE)成熟肽编码区片段 .测序结果表明 :DFE成熟肽编码区长 82 5bp,编码 2 75个氨基酸残基 ,分子量为 2 7.7× 10 3 ,推导的N’ -端氨基酸序列与豆豉溶栓酶N’ -端氨基酸测序结果完全一致 ,说明克隆到的基因确实是豆豉溶栓酶基因 .同源性分析表明 ,DFE成熟肽编码区的核苷酸和氨基酸序列与日本纳豆激酶的同源性分别为 80 .0 %和 86 .5 % ,这提示豆豉溶栓酶可能是一种新型的溶栓酶 .将表达质粒pET Nde转化E .coliBL2 1(DE3)中 ,IPTG可诱导表达大量的DFE融合蛋白 ,占菌体可溶性蛋白的 4 0 % ,主要以包涵体的形式存在 .图 3表 1参 19     

酶联免疫吸附分析法测定苯并(a)芘和多氯联苯

对苯并(a)芘作了五种不同的化学修饰,并与载体蛋白交联,制备出十四种单克隆抗体.经单克隆抗体的筛选和实验条件的优化,建立了测定苯并(a)芘的酶联免疫吸附分析法.以4,4'-二氯联苯为测定多氯联苯的酶联免疫吸附分析法的起始物,作了二种化学修饰,制备出九种多克隆抗体,建立了以羊抗多氯联苯抗体为基础的酶联免疫吸附分析法,并用于土壤中多氯联苯的测定.